糖皮質(zhì)激素信號(hào)通路在發(fā)育、體液穩(wěn)態(tài)、認(rèn)知、免疫反應(yīng)和代謝中發(fā)揮著重要作用。糖皮質(zhì)激素是一類類固醇激素,可與糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合,導(dǎo)致其易位至細(xì)胞核。易位后,受體可以調(diào)節(jié)大量基因的轉(zhuǎn)錄,包括調(diào)節(jié)葡萄糖代謝和炎癥反應(yīng)的基因。
糖皮質(zhì)激素受體通路報(bào)告試劑盒旨在監(jiān)測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中糖皮質(zhì)激素信號(hào)通路的活性。該試劑盒包含糖皮質(zhì)激素受體配體結(jié)合域的轉(zhuǎn)染就緒表達(dá)載體,該載體與gal4的dna結(jié)合域(dbd)融合(gal4 dbd-gr)。該融合構(gòu)建體在多聚化gal4上游激活序列(uas)的控制下激活螢火蟲熒光素酶表達(dá)。這允許特異性檢測(cè)糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的糖皮質(zhì)激素受體激活,而不需要單獨(dú)的轉(zhuǎn)錄靶標(biāo),并且與其他核受體途徑的交叉反應(yīng)性較低。gal4/uas報(bào)告基因與組成型表達(dá)海腎(海三色堇)熒光素酶載體預(yù)混合,
該試劑盒還包括與組成型表達(dá)海腎熒光素酶載體預(yù)混合的非誘導(dǎo)型螢火蟲熒光素酶載體作為陰性對(duì)照。非誘導(dǎo)型熒光素酶載體包含受最小啟動(dòng)子控制的螢火蟲熒光素酶基因,但沒(méi)有任何額外的響應(yīng)元件。陰性對(duì)照對(duì)于確定途徑特異性效應(yīng)和背景熒光素酶活性至關(guān)重要。
艾美捷gal4報(bào)告基因試劑盒(糖皮質(zhì)激素受體途徑):
貨號(hào):60522
英文名稱:gal4 reporter kit (glucocorticoid receptor pathway)
規(guī)格:500 rxns.
同義詞:糖皮質(zhì)激素受體、gr、核受體亞家族3 c組成員1、nr3c1、gal4、gal4/uas、半乳糖凝集素、基于細(xì)胞的檢測(cè)試劑盒、基于細(xì)胞的檢測(cè)、報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒
需要但未提供的材料:
•哺乳動(dòng)物細(xì)胞系和適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基
•96孔組織培養(yǎng)板或經(jīng)過(guò)96孔組織培養(yǎng)處理的白色透明底檢測(cè)板(corning # 3610)
• 用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染試劑
•opti-mem i低血清培養(yǎng)基(life technologies #31985-062)
• 兩步熒光素酶測(cè)定系統(tǒng):
兩步熒光素酶(螢火蟲和海腎)測(cè)定(bps bioscience #60683):該系統(tǒng)直接在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中測(cè)定細(xì)胞。它可以與任何光度計(jì)一起使用。
不需要自動(dòng)注射器。
• 光度計(jì)
gal4報(bào)告基因試劑盒(糖皮質(zhì)激素受體途徑)組分:
gal4報(bào)告基因試劑盒(糖皮質(zhì)激素受體途徑)文獻(xiàn)參考:
paguio a, et al. (2010) improved dual-luciferase reporter assays for nuclear receptors. curr chem genomics. 4: 43-49.
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