色譜柱的正確運(yùn)用和保護(hù)養(yǎng)護(hù):
色譜柱的正確運(yùn)用和保護(hù)十分重要,稍有不小心就會(huì)下降柱效、縮短運(yùn)用壽數(shù)乃至損壞。在色譜操作過(guò)程中,需求注意下列疑問(wèn),以保護(hù)色譜柱。
1、新的色譜柱前運(yùn)用要活化
2、防止壓力和溫度的急劇改動(dòng)及任何機(jī)械轟動(dòng)。溫度的俄然改動(dòng)或許使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充情況;柱壓的俄然升高或下降也會(huì)激動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)理流速時(shí)大概緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)變不能過(guò)緩(如前所述)。
3、應(yīng)逐步改動(dòng)溶劑的組成,特別是反相色譜中,不該直接從有機(jī)溶劑改動(dòng)為全部是水,反之亦然。
4、一般說(shuō)來(lái)色譜柱不能反沖,只要生產(chǎn)者指明該柱能夠反沖時(shí),才能夠反沖除掉留在柱頭的雜質(zhì)。不然反沖會(huì)敏捷下降柱效。
新色譜柱的活化:
1、裝置以乙腈(反相)或乙腈正己烷(1:99)正相沖刷整個(gè)系統(tǒng)。
2、查看流路體系有無(wú)氣泡,氣泡會(huì)形成色譜柱填料空隙而影響色譜柱的別離效能。
3按色譜柱上標(biāo)明方向,接上色譜柱,開(kāi)始流速為0.1-0.2ml/min逐步大,1.0ml/min,所需試劑為10倍柱體積,暫停體系,更換流動(dòng)相,開(kāi)始流速為0.1-0.2,逐步增大,直到體系平衡。
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