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氨基柱正反相都可以使用

氨基柱是一款既可以正相使用,也可以反相使用,但是我們要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,正常情況新氨基柱出廠時(shí)保存在正相環(huán)境中,而luna的 氨基柱查找說(shuō)明書是保存在正己烷-乙腈(99:1)中。對(duì)于新氨基柱,首先應(yīng)詳細(xì)閱讀使用說(shuō)明書,了解柱子出廠保存溶劑。一般出廠會(huì)保存在正相溶劑中,如果保存溶劑與你將要使用的流動(dòng)相極性不同不互溶,請(qǐng)先用異丙醇過(guò)渡。過(guò)渡過(guò)程中應(yīng)注意異丙醇粘度較大,會(huì)導(dǎo)致柱壓很高,應(yīng)使用小流速過(guò)渡。
i)當(dāng)使用反相模式時(shí),用前請(qǐng)使用異丙醇小流速過(guò)夜平衡色譜柱。流速建議0.1-0.2ml/min,之后再轉(zhuǎn)換到99%乙腈沖洗20柱體積,然后轉(zhuǎn)換到和流動(dòng)相相同比例的不含鹽的乙腈水體系沖洗20柱體積。
ii)當(dāng)使用正相模式時(shí),如與出廠保存溶劑互溶,可使用流動(dòng)相直接沖洗20倍柱體積;如不互溶請(qǐng)用異丙醇過(guò)渡。
如果大家是用于正相的體系:
1. 推薦先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積,最后換成你實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相
2.正相使用時(shí),不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;流動(dòng)相要脫氣,并不得含有羰基化合物和過(guò)氧化物(質(zhì)量不好的、四氫呋喃含有少量)
3. 任何時(shí)候更換流動(dòng)相時(shí)都要確保新流動(dòng)相與柱子原保存液可互溶。
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),正相條件下使用的氨基柱參照硅膠柱的清洗方法;反相條件下使用的氨基柱參照c18的清洗方法。
i)正相使用時(shí),將柱子沖洗干凈后,用正己烷-乙腈(99:1)保存(即出廠模式)。
ii)反相使用時(shí),如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;長(zhǎng)期不用時(shí)需用異丙醇置換然后保存在正相模式下(即出廠模式)

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