安捷倫液相色譜儀1100，附紫外檢測器(spd-10avp/10avvp)；2010色譜工作站；at-230columnheater。*的精制品、*精制品(內標氟氯西林精制品(含量94.0%)、內標*精制品(含量97.2%)；甲醇、乙腈均為一級色譜純，純度99.9%)；水為去離子水；其余試劑均為分析純。
*的色譜條件：色譜柱(150mm×4.6mm，5)；流動相0.05mol-l磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀2.7g，溶于1000ml去離子水中，用氫氧化鉀溶液調ph4.5，過濾)一乙腈(68：32)，加0.3%三乙胺；流速1.0ml·min～；檢測波長225nm；柱溫25；進樣量20trl；內標氟氯西林。*的色譜條件：島津shim—packvp—ods色譜柱(150mm×4。6mm，5)；流動相0.033mol·l磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀2.22g、*2.610g，溶于1000ml去離子水中用氫氧化鉀溶液調ph7。2，過濾)一甲醇(88：12)流速1.0ml·min～；檢測波長229nm；柱溫20℃進樣量20trl；內標*。
精密移取空白血漿450l，分別加人*或*標準工作液50，內標氟氯西林或替硝儲備液5，混勻后，加入冷凍的甲醇500，旋渦混合，置于4℃冰箱15min，14000r·min一離心10min，取20l上清液進樣。
色譜分離在上述色譜條件下，*及內標氟氯西林與血漿得到*分離，其保留時間分別為7.1min和5.5min。
　*具有兩性化合物的性質，且與血漿中的極性物質性質相近，因此血漿樣品預處理與色譜分離十分困難。資源等用固相萃取法、carlqvistj等用柱切換法來進行樣品預處理，但儀器設備復雜、操作煩瑣。故*hplc法多用直接沉淀蛋白法來處理血樣，調控柱溫的方式，建立了相同的樣品預處理方法，不同的色譜條件分離分析人血漿中*和*的液相色譜法。

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