酶聯接免疫吸附劑測定(enzyme-linkedimmunosorbnentassay)是elisa的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。elisa是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。elsia試驗所用試劑器材:
一、試劑:
1、 包被緩沖液(ph9.60.05m碳酸鹽緩沖液):
naco31.59克 nahco3 2.93克加蒸餾水至1000ml
2、洗滌緩沖液(ph7.4pbs):0.15m kh2po40.2克 na2hpo4·12h2o 2.9克 nacl8.0克kcl0.2克tween-200.05%0.5ml加蒸餾水至1000ml
3、 稀釋液:牛血清白蛋白(bsa)0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
4、終止液(2mh2so4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
5、底物緩沖液(ph5.0磷酸棗檸檬酸):0.2mna2hpo4(28.4克/l)25.7ml 0.1m檸檬酸(19.2克/l)24.3ml 加蒸餾水50ml。
6、tmb(四甲基聯苯胺)使用液:tmb(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(ph5.5)10ml0.75%h2o232μl
7、abts使用液:abts 0.5mg 底物緩沖液(ph5.5)1ml 3%h2o2 2μl
8、抗原、抗體和酶標記抗體。
9、正常人血清和陽性對照血清。
二. 器材:
1、聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,elisa檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
2、 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
3、4℃冰箱,37℃孵育箱。
關鍵詞:吸附劑
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