血清,指血液凝結后,在血漿中除掉纖維蛋白原別離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除掉的血漿。其主要效果是供給基本營養物質、供給激素和各種成長因子、供給結合蛋白、供給促觸摸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些維護效果。
血清的保存應該注意以下幾點:
(1)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*凍結的血清.加熱過程中須規矩搖晃均勻.此熱處理的意圖是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非有必要,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會形成血清沉積物明顯增多,而且還會影響血清的質量.補體參加反應有:細胞毒效果, 平滑肌細胞縮短, 肥大細胞和血小板開釋組胺, 增強吞噬效果, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化.
(2)需求*保存的血清有必要貯存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超越1個月.因為血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂
(3)瓶裝血清凍結需采用逐步凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿形成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉積的發生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍結,這樣因溫度改動太大,容易形成蛋白質凝集而呈現沉積.
(4)一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一同過濾,切勿直接過濾血清.
(5)血清中的沉積物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結后血清中纖維蛋白形成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下小黑點:通過熱處理過的血清,沉積物的形成會明顯增多.有些沉積物在顯微鏡下調查象小黑點,常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞成長,但假如懷疑血清質量,則應立即停止使用,替換另一批號的血清.
(6)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得污濁,一起血清中的有效成分會損壞而影響血清質量.
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