mtt細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒使用指南
mtt可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物formazan，在特定溶劑存在的情況下，可以被完全溶解，然后通過酶標儀可以測定490nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快，則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。
產品名稱：mtt細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
英文名稱：mtt cell proliferation and cytotoxicity assay kit
規格：500t
儲存條件：-20℃，避光
使用說明：
1.收集對數期細胞，調整細胞懸液濃度，分于96孔板，每孔180μl，3000-10000個細胞/孔。
2.置37℃、5%co2溫箱培養使細胞貼壁，培養6-24小時。
3.加入適當濃度的受試化合物，繼續培養適當時間。
4.小心吸去上清，加入90μl新鮮培養液，再加入10μl mtt溶液，繼續培養4 h。
5.然后吸掉上清，每孔加入110μl formazan溶解液，置搖床上低速振蕩10 min，使結晶物充分溶解。在酶聯免疫檢測儀490 nm處測量各孔的吸光值。
6.同時設置調零孔（培養基、mtt、 formazan溶解液），對照孔（細胞、相同濃度的藥物溶解介質、培養液、mtt、 formazan溶解液），每組設定3復孔。
注意事項：
1.由于使用96孔板進行檢測，如果細胞培養時間較長，一定要注意蒸發的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈最容易蒸發，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加pbs，水或培養液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養箱內水源的地方，以緩解蒸發。
2.mtt溶液為黃色需避光保存，長時間光照會導致失效。當顏色變為灰綠色時，請勿使用。formazan溶解液結凍或產生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。
3.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
關鍵詞：酶標儀 培養箱

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