細胞培養基的類型
經典的培養基有很多種，其中 dmem、 rpmi 1640、 mem 、 dmem/f12 都是應用廣泛的培養基。其他 如 m199 、 imdm 、 l15培養基等也用于某些細胞的培養。其具體的特征及應用如下：
1、bme細胞培養基基礎 eagle 培養基 (bme) 是一種廣泛使用的合成基礎培養基，可支持很多種類的哺乳動物細胞生長。bme 最初1955年由 harry eagle 針對 hela 細胞和小鼠成纖維細胞開發，其發現了體外細胞生長的要求。此后 bme 已用于其他人細胞系，包括 wi-38 和 mrc-5。bme 含有八種 b 族維生素、十種必需氨基酸以及胱氨酸、酪氨酸和谷氨酰胺以及酚紅，不含有l-谷氨酰胺和hepes。bme 不含蛋白、脂質或生長因子。因此，bme 需要補充營養成分，通常需要添加 10%胎牛血清(fbs)。bme 使用碳酸氫鈉緩沖系統 (2.2 g/l)，因此需要 5-10% co2 環境來維持生理 ph 值。在此基礎上改良的細胞培養基品種有mem、dmem、imdm等。2、mem細胞培養基mem (minimum essential medium) 又稱eagle培養基，1959年在eagle's基礎培養基（bme）上修改而來，刪去賴氨酸、生物素，是一種較為常用的細胞培養基。mem 可用于各種懸浮和貼壁的哺乳動物細胞的培養，包括 hela、bhk-21、293、hep-2、ht-1080、mcf-7、成纖維細胞和原代大鼠星形膠質細胞等。 harry eagle此后對 mem 進行了許多其他改良，包括 glasgow’s mem、mem α、dmem 以及 temin’s 改良培養基。mem 含有 earle’s 平衡鹽用于 co2 培養箱，或含有 hanks' 平衡鹽用于無 co2 培養箱。3、dmem細胞培養基dmem (dulbecco's modified eagle medium)是由dulbecco改良的eagle培養基，是一種廣泛使用的基礎培養基，可用于支持很多種類的哺乳動物細胞生長。已經在 dmem 中成功培養出的細胞包括原代成纖維細胞、神經元、膠質細胞、huvec、平滑肌細胞，以及 hela、293、cos-7 和 pc-12 等細胞系。dmem 與其他培養基的不同之處在于其含有相當于初始 eagle 必需培養基 4 倍濃度的氨基酸和維生素。采用雙倍的hco3-和co2濃度起到更好的緩沖作用。dmem 最初采用低濃度葡萄糖 (1 g/l) 和丙酮酸鈉配制，但通常在含/不含丙酮酸鈉的高糖環境下使用。后來將葡萄糖含量調整至(4.5g/l)，就是我們用的高糖dmem。低糖適于依賴性貼壁細胞培養，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。高糖更適合高密度懸浮細胞培養，也適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和dna轉染的轉化細胞的培養。例如cho細胞表達生產乙肝疫苗、cho細胞表達epo。4、imdm細胞培養基imdm（iscove's modified dulbecco's medium，iscove 改良杜氏培養基）非常適用于快速增殖的高密度細胞培養，包括 jurkat、cos-7 和巨噬細胞。guilber 和iscove將dulbecco' medium 改良為 iscove's medium，用于培養紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養基包含硒和其他氨基酸及維生素。此外，這款培養基不含鐵，使用硝/酸鉀取代硝/酸鐵。imdm還能夠促進小鼠b淋巴細胞，lps刺激的b細胞，骨髓造血細胞，t細胞和淋巴瘤細胞的生長。5、rpmi-1640細胞培養基rpmi 1640 培養基 (roswell park memorial institute 1640 medium) 起初是1967年moore等人研制，為了懸浮培養人白血病單層細胞而開發的。此后，rpmi 1640 培養基被發現適用于多種哺乳動物細胞，包括 hela 細胞、jurkat 細胞、mcf-7 細胞、pc12 細胞、pbmc 細胞、星形膠質細胞和癌細胞。rpmi 1640 培養基相比其他培養基之所以具有好效果，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。rpmi 1640 培養基含有生物素、維生素 b12 以及 paba，這些成分是 eagle's mem 和 dmem 所不具備的。此外，該培養基之中還含有高濃度的維生素肌醇和膽堿。rpmi-1640包含 glutamax、酚紅；不包含 hepes。6、hamf10細胞培養基1963年ham設計，含微量元素，可在血清含量低時用，適用于克隆化培養。ham's f-10 營養培養基可用于無血清生長的中國倉鼠卵巢（cho）細胞和需添加血清的多種哺乳動物細胞系的生長。7、dmem/f12細胞培養基ham's f-12 營養混合物 (f-12) 設計用于中國倉鼠卵巢 (cho) 細胞的無血清單細胞鋪板。自此之后，f-12 已用于 cho 培養物的無血清生長以及其他哺乳動物細胞的添加血清生長，包括軟骨細胞和大鼠前列腺上皮細胞。與其他基礎培養基相比，f-12 含有更廣泛的成分，包括鋅、腐胺和胸苷。f-12 不含蛋白質或生長因子
dmem/f-12 是一種 1:1 dmem 和 ham's f-12 混合物。該配方將 dmem 的高濃度葡萄糖、氨基酸及維生素與 f-12 的廣泛組分結合在一起。dmem/f-12 (dulbecco's modified eagle medium/nutrient mixture f-12) 是一種廣泛使用的基礎培養基，可用于支持很多種類的哺乳動物細胞生長。已在 dmem/f-12 中成功培養的細胞包括 mdck、膠質細胞、成纖維細胞、人內皮細胞及小鼠成纖維細胞。8、m199細胞培養基1950年morgan等設計的具有確定化學成分的細胞培養液，即m-199。199 培養基起初開發用于雞胚成纖維細胞的營養研究。它具有廣泛的物種適用性，特別適用于非轉化細胞的培養。199 培養基廣泛用于病毒學、疫苗生產以及小鼠胰腺上皮和大鼠晶狀體組織原代外植體的體外培養。與其他基礎培養基相比，199 培養基含有的成分，包括腺嘌呤、腺苷、胸腺嘧啶和其他維生素。9、mccoy5a培養基1959年mecoy為肉瘤細胞設計，bss＋40種成分。可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細胞培養外，主要用于作組織活檢培養、一些淋巴細胞培養以及一些難培養細胞的生長支持。例如jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、ht-29、bhl-100等上皮細胞。10、l15 細胞培養基leibovitz l-15 培養基支持 hep-2 猴腎臟細胞以及胚胎和成人組織的原代組織塊生長。l-15 采用磷酸鹽和游離氨基酸而非碳酸氫鈉進行緩沖。l-15培養液適用于快速增殖瘤細胞的培養，用于在co2缺乏的情況下培養腫瘤細胞株。此培養液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。
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1、bme細胞培養基基礎 eagle 培養基 (bme) 是一種廣泛使用的合成基礎培養基，可支持很多種類的哺乳動物細胞生長。bme 最初1955年由 harry eagle 針對 hela 細胞和小鼠成纖維細胞開發，其發現了體外細胞生長的要求。此后 bme 已用于其他人細胞系，包括 wi-38 和 mrc-5。bme 含有八種 b 族維生素、十種必需氨基酸以及胱氨酸、酪氨酸和谷氨酰胺以及酚紅，不含有l-谷氨酰胺和hepes。bme 不含蛋白、脂質或生長因子。因此，bme 需要補充營養成分，通常需要添加 10%胎牛血清(fbs)。bme 使用碳酸氫鈉緩沖系統 (2.2 g/l)，因此需要 5-10% co2 環境來維持生理 ph 值。在此基礎上改良的細胞培養基品種有mem、dmem、imdm等。2、mem細胞培養基mem (minimum essential medium) 又稱eagle培養基，1959年在eagle's基礎培養基（bme）上修改而來，刪去賴氨酸、生物素，是一種較為常用的細胞培養基。mem 可用于各種懸浮和貼壁的哺乳動物細胞的培養，包括 hela、bhk-21、293、hep-2、ht-1080、mcf-7、成纖維細胞和原代大鼠星形膠質細胞等。 harry eagle此后對 mem 進行了許多其他改良，包括 glasgow’s mem、mem α、dmem 以及 temin’s 改良培養基。mem 含有 earle’s 平衡鹽用于 co2 培養箱，或含有 hanks' 平衡鹽用于無 co2 培養箱。3、dmem細胞培養基dmem (dulbecco's modified eagle medium)是由dulbecco改良的eagle培養基，是一種廣泛使用的基礎培養基，可用于支持很多種類的哺乳動物細胞生長。已經在 dmem 中成功培養出的細胞包括原代成纖維細胞、神經元、膠質細胞、huvec、平滑肌細胞，以及 hela、293、cos-7 和 pc-12 等細胞系。dmem 與其他培養基的不同之處在于其含有相當于初始 eagle 必需培養基 4 倍濃度的氨基酸和維生素。采用雙倍的hco3-和co2濃度起到更好的緩沖作用。dmem 最初采用低濃度葡萄糖 (1 g/l) 和丙酮酸鈉配制，但通常在含/不含丙酮酸鈉的高糖環境下使用。后來將葡萄糖含量調整至(4.5g/l)，就是我們用的高糖dmem。低糖適于依賴性貼壁細胞培養，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。高糖更適合高密度懸浮細胞培養，也適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和dna轉染的轉化細胞的培養。例如cho細胞表達生產乙肝疫苗、cho細胞表達epo。4、imdm細胞培養基imdm（iscove's modified dulbecco's medium，iscove 改良杜氏培養基）非常適用于快速增殖的高密度細胞培養，包括 jurkat、cos-7 和巨噬細胞。guilber 和iscove將dulbecco' medium 改良為 iscove's medium，用于培養紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養基包含硒和其他氨基酸及維生素。此外，這款培養基不含鐵，使用硝/酸鉀取代硝/酸鐵。imdm還能夠促進小鼠b淋巴細胞，lps刺激的b細胞，骨髓造血細胞，t細胞和淋巴瘤細胞的生長。5、rpmi-1640細胞培養基rpmi 1640 培養基 (roswell park memorial institute 1640 medium) 起初是1967年moore等人研制，為了懸浮培養人白血病單層細胞而開發的。此后，rpmi 1640 培養基被發現適用于多種哺乳動物細胞，包括 hela 細胞、jurkat 細胞、mcf-7 細胞、pc12 細胞、pbmc 細胞、星形膠質細胞和癌細胞。rpmi 1640 培養基相比其他培養基之所以具有好效果，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。rpmi 1640 培養基含有生物素、維生素 b12 以及 paba，這些成分是 eagle's mem 和 dmem 所不具備的。此外，該培養基之中還含有高濃度的維生素肌醇和膽堿。rpmi-1640包含 glutamax、酚紅；不包含 hepes。6、hamf10細胞培養基1963年ham設計，含微量元素，可在血清含量低時用，適用于克隆化培養。ham's f-10 營養培養基可用于無血清生長的中國倉鼠卵巢（cho）細胞和需添加血清的多種哺乳動物細胞系的生長。7、dmem/f12細胞培養基ham's f-12 營養混合物 (f-12) 設計用于中國倉鼠卵巢 (cho) 細胞的無血清單細胞鋪板。自此之后，f-12 已用于 cho 培養物的無血清生長以及其他哺乳動物細胞的添加血清生長，包括軟骨細胞和大鼠前列腺上皮細胞。與其他基礎培養基相比，f-12 含有更廣泛的成分，包括鋅、腐胺和胸苷。f-12 不含蛋白質或生長因子
dmem/f-12 是一種 1:1 dmem 和 ham's f-12 混合物。該配方將 dmem 的高濃度葡萄糖、氨基酸及維生素與 f-12 的廣泛組分結合在一起。dmem/f-12 (dulbecco's modified eagle medium/nutrient mixture f-12) 是一種廣泛使用的基礎培養基，可用于支持很多種類的哺乳動物細胞生長。已在 dmem/f-12 中成功培養的細胞包括 mdck、膠質細胞、成纖維細胞、人內皮細胞及小鼠成纖維細胞。8、m199細胞培養基1950年morgan等設計的具有確定化學成分的細胞培養液，即m-199。199 培養基起初開發用于雞胚成纖維細胞的營養研究。它具有廣泛的物種適用性，特別適用于非轉化細胞的培養。199 培養基廣泛用于病毒學、疫苗生產以及小鼠胰腺上皮和大鼠晶狀體組織原代外植體的體外培養。與其他基礎培養基相比，199 培養基含有的成分，包括腺嘌呤、腺苷、胸腺嘧啶和其他維生素。9、mccoy5a培養基1959年mecoy為肉瘤細胞設計，bss＋40種成分。可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細胞培養外，主要用于作組織活檢培養、一些淋巴細胞培養以及一些難培養細胞的生長支持。例如jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、ht-29、bhl-100等上皮細胞。10、l15 細胞培養基leibovitz l-15 培養基支持 hep-2 猴腎臟細胞以及胚胎和成人組織的原代組織塊生長。l-15 采用磷酸鹽和游離氨基酸而非碳酸氫鈉進行緩沖。l-15培養液適用于快速增殖瘤細胞的培養，用于在co2缺乏的情況下培養腫瘤細胞株。此培養液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。
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