goldview核酸染料原理是什么
goldview核酸染料原理
goldview是一種可代替溴化乙錠(eb)的新型核酸染料,采用瓊脂糖電泳檢測dna時,goldviewtm與核酸結合后能產生很強的熒光信號,其靈敏度與eb相當,使用方法與之*相同。在紫外透射光下雙鏈dna呈現綠色熒光,而單鏈dna呈紅色熒光。goldview不僅能染dna,也可用于染rna。
通過ames實驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗、小鼠精母細胞染色體畸變試驗,致突變性結果均為陰性;而溴化乙錠(eb)是一種強致癌劑。因此用goldviewtm代替eb不失為一種明智的選擇。
goldview核酸染料使用方法
1. 將100ml瓊脂糖凝膠溶液(濃度一般為0.8%~2%)在微波爐中融化。
2. 加入5µl goldview,輕輕搖勻,避免產生氣泡。
3. 冷卻至不燙手時倒膠,待瓊脂糖凝膠*凝固后上樣電泳。
4. 電泳完畢在紫外燈下觀察。若使用數碼相機照像記錄,則關閉相機的閃光燈,放在自動檔即可;若使用凝膠成像系統照相,通過調節光圈、曝光時間,選擇合適的濾光片,可得到成像清晰、背景較低的照片。
goldview核酸染料注意事項
1. 膠厚度不宜超過12.5px,膠太厚會影響檢測的靈敏度。
2. 加入goldview的瓊脂糖凝膠反復融化可能會對核酸檢測的靈敏度產生一定影響,但不明顯。
3. 通過凝膠電泳回收dna片段時,建議使用goldview染色,在自然光下切割dna條帶,避免紫外線與eb對目的dna產生的損傷,可明顯提高克隆、轉化、轉錄等分子生物學下游操作的效率。
4. 雖然未發現goldview有致癌作用,但對皮膚、眼睛會有一定的刺激,操作時應戴上手套。
電泳結果顯示gv靈敏度與eb相當
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