《糧油檢驗 谷物中黃曲霉毒素B1測定》征求意見
由國家糧食和物資儲備局組織起草的《糧油檢驗 谷物中黃曲霉毒素 b1測定 超導(dǎo)量點免疫熒光快速定量法》標(biāo)準(zhǔn)已形成征求意見稿，現(xiàn)向社會公開征求意見，截止日期為2023年7月19日。意見反饋郵箱：tc270sc1@ags.ac.cn。
黃曲霉毒素 b1是已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性最強(qiáng)的一種。黃曲霉毒素 b1對人和動物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害。在天然食物中以黃曲霉毒素 b1最為多見，危害性也最強(qiáng)，是大部分食品的必檢項目之一。
糧食作為我國飲食結(jié)構(gòu)金字塔最底端，在我國居民飲食結(jié)構(gòu)中所占比例最高，其質(zhì)量安全更是不容小覷。然而，糧食真菌毒素污染事件時有發(fā)生，據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織估計，全世界谷物供應(yīng) 25%受真菌毒素污染而不能食用，其中又以黃曲霉毒素污染最為嚴(yán)重。因此，大力發(fā)展準(zhǔn)確、高效的黃曲霉毒素快速檢測技術(shù)，提高糧食黃曲霉毒素的監(jiān)管時效性，對把好糧食市場準(zhǔn)入關(guān)，確保糧食流通安全具有重要現(xiàn)實意義。
在當(dāng)前綠色、安全的糧食發(fā)展背景下，糧食污染物快速檢測技術(shù)是糧食行業(yè)的發(fā)展重點，各種快速檢測方法紛紛涌現(xiàn)，為糧食安全的保駕護(hù)航發(fā)揮了重要作用。為確保方法使用的合法性，將這些快速檢測方法進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)尿炞C并形成方法標(biāo)準(zhǔn)符合當(dāng)前政策和形勢，也符合社會需求。目前，已形成標(biāo)準(zhǔn)的真菌毒素快速檢測方法主要是酶聯(lián)免疫法和膠體金快速定量法，尚不足以完全滿足當(dāng)前行業(yè)對真菌毒素快速檢測技術(shù)的需求。本項目以超導(dǎo)量點免疫熒光技術(shù)為基礎(chǔ)，利用超導(dǎo)量點的增敏作用，有效提高了黃曲霉毒素 b1的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性。同時，該方法對樣品前處理方法進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)合該方法測定樣品時較短的上機(jī)時間，大大縮短了樣品的檢測時間，提高了樣品的檢測效率。該方法形成標(biāo)準(zhǔn)將為糧食黃曲霉素 b1的監(jiān)管準(zhǔn)確性和時效性發(fā)揮重要作用。
本文件按照 gb/t 1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第 1 部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
本文件規(guī)定了谷物中黃曲霉毒素b1的超導(dǎo)量點免疫熒光快速定量檢測方法的原理、試劑、儀器設(shè)備及材料、樣品制備、樣品測定、結(jié)果表述、重復(fù)性。本文件適用于小麥、稻谷、玉米等谷物及其制品中黃曲霉毒素b1的快速定量檢測。方法檢出限為0.5μg/kg，定量限為1.5μg/kg。
原理：
本方法基于超導(dǎo)量點標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)，采用熒光側(cè)向免疫層析(fluorescent lateral flow，flf)方法學(xué)原理。試樣中的黃曲霉毒素b1抗原和固定在檢測線t線上的黃曲霉毒素b1抗原與超導(dǎo)量點標(biāo)記黃曲霉毒素b1抗體競爭反應(yīng)，熒光分析儀讀取的熒光信號與試樣中黃曲霉毒素b1含量呈反比，根據(jù)儀器內(nèi)置曲線自動計算樣品中黃曲霉毒素b1的含量。
儀器設(shè)備及材料：
除實驗室常規(guī)儀器、設(shè)備外，需用到下列儀器設(shè)備。
1.天平：分度值 0.01g。
2.粉碎機(jī)：可使試樣粉碎后全部通過20目篩。
3.離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。
4.渦旋振蕩器。
5.免疫熒光分析儀：可測定并顯示超導(dǎo)量點免疫熒光定量檢測卡的測定結(jié)果。
6.qd-infinity 黃曲霉毒素 b1超導(dǎo)量點免疫熒光定量檢測卡1：常溫避光儲存，具體儲存條件參照使用說明；技術(shù)要求見附錄 a。
7.濾紙：中速定量濾紙。
8.計時器。
樣品測定：
1.開啟免疫熒光分析儀(5.5)。
2.將超導(dǎo)量點免疫熒光定量檢測卡(5.6)從冷藏狀態(tài)取出放置至室溫，加樣孔朝上平放。
3.準(zhǔn)確移取 75 μl 待測液(6.2.2)，加入檢測卡加樣孔中。
4.檢測卡加樣后，水平靜置反應(yīng)15min，然后在3min 內(nèi)將檢測卡插入免疫熒光分析儀(5.5)，儀器將自動進(jìn)行檢測。
5.免疫熒光分析儀(5.5)自動完成數(shù)據(jù)讀取、分析、顯示并保存檢測結(jié)果。
若顯示值>50μg/kg，則移取100μl6.2.2 中濾液或上清液，加入300μl 試樣提取液(4.2)，充分混勻后取100μl 至一潔凈的離心管中，加入400μl 稀釋緩沖液(4.1)，充分混勻，按照8.2～8.5進(jìn)行測定。
結(jié)果表述：
試樣中黃曲霉毒素b1的含量由免疫熒光分析儀自動計算并顯示，單位為微克每千克(μg/kg)。
重復(fù)性：
在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不超過算術(shù)平均值的20%。
更多詳情請見附件。
相關(guān)資料下載： 《糧油檢驗 谷物中黃曲霉毒素b1測定 超導(dǎo)量點免疫熒光快速定量法》.rar 意見反饋表.doc
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黃曲霉毒素 b1是已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性最強(qiáng)的一種。黃曲霉毒素 b1對人和動物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害。在天然食物中以黃曲霉毒素 b1最為多見，危害性也最強(qiáng)，是大部分食品的必檢項目之一。
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重復(fù)性：
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