Agilent 1260 液相色譜系統(tǒng)對18 種抗生素進行有關(guān)物質(zhì)分析
摘要：本文介紹了使用 agilent advancebio sec 色譜柱及 agilent 1260 infinity ii 液相色譜系統(tǒng)對 18 種抗生素進行有關(guān)物質(zhì)分析的結(jié)果。本實驗使用《中國藥典》建議的流動相，能夠獲得出色的分離度及穩(wěn)定的分析結(jié)果。本文提供的相關(guān)圖譜可作為抗生素 sec 分析的參考。
前言：抗生素是臨床常用的藥物之一，較易發(fā)生過敏反應(yīng)?？股刂械母叻肿泳酆衔镫s質(zhì)是引發(fā)過敏反應(yīng)的真正過敏原，因此嚴格控制抗生素藥物中的高分子聚合物含量具有重要意義。聚合物含量通常照分子排阻色譜法測定。目前大多采用葡聚糖凝膠柱，但此類填料的機械強度差且柱效低，因此聚合物分析填料逐漸發(fā)展為球狀親水硅膠。
《中國藥典》已有數(shù)個品種以有關(guān)物質(zhì) ii 的檢測項目形式收載了使用球狀親水硅膠 sec 的方法1 。目前市面上主要有兩種類型的球狀親水硅膠基質(zhì)：鍵合二醇基的硅膠 (usp l20) 和鍵合親水涂層的硅膠 (usp l59)。較為傳統(tǒng)的 usp l20 鍵合相由于存在較多的殘留硅醇基，通常需要較高離子強度的流動相以克服非特異性相互作用。而 agilent advancebio sec 色譜柱（l59 型）采用聚合物親水涂層，殘留硅醇基數(shù)目大幅減少，從而能夠有效抑制非特異性相互作用，實現(xiàn)聚集體的準(zhǔn)確定量分析。此外，2.7 μm的填料粒徑以及更大的孔容設(shè)計，都有助于進一步提升色譜分離效果。
實驗部分：試劑和樣品無水*與十二水合*均購自 sigma-aldrich 公司。實驗用水取自 merck millipore milli-q 超純水系統(tǒng)。磷酸鹽緩沖液：5 mmol/l na2hpo4:5 mmol/l nah2po4 (61:39)。所有樣品均為實際樣品。樣品均為市購產(chǎn)品。樣品溶解于流動相后過 0.22 µm 濾膜。樣品濃度均為 1 mg/ml。儀器和設(shè)備本實驗采用 agilent 1260 infinity ii 液相色譜系統(tǒng)，該系統(tǒng)配備二極管陣列檢測器。所用色譜柱為 agilent advancebio sec 130å, 7.8 × 300 mm, 2.7 µm（部件號：pl1180-5350）。樣品前處理準(zhǔn)確稱取 10 mg 抗生素粉末狀樣品于 10 ml 離心管內(nèi)，加入流動相 10 ml 后，超聲 1 分鐘。經(jīng) 0.22 µm 濾膜過濾后，取續(xù)濾液進樣分析。色譜條件色譜柱：advancebio sec 130å, 7.8 × 300 mm, 2.7 µm（部件號： pl1180-5350）流動相：5 mmol/l 磷酸鹽緩沖液（含 5% 乙腈），ph 7.0 進樣量：5 μl 柱溫：25 ℃ 流速：0.6 ml/min 等度運行檢測波長：254 nm
結(jié)果與討論：本實驗采用了 agilent advancebio sec 色譜柱和 agilent 1260 infinity ii 液相色譜系統(tǒng)對*、*、*、*、*、*、*、*、*鈉、*鈉、頭孢匹羅、*、*鈉、*鈉、*、*鈉、頭孢西林鈉、*鈉共 18 種抗生素進行有關(guān)物質(zhì)分析，并獲得了分離結(jié)果，
與 tsk g2000swxl 相比，advancebio sec 色譜柱擁有更好的分離度與分離效率，色譜柱塔板數(shù)是 tsk 同規(guī)格產(chǎn)品的近 2 倍。advancebio sec 色譜柱能耐受更高的壓力，機械強度更高，advancebio sec 色譜柱在前述條件下壓力約為 100 bar， advancebio sec 色譜柱耐壓 400 bar，*操作壓力不超過 200 bar，色譜柱壽命明顯延長。每份樣品均重復(fù)進樣 3 次，保留時間無明顯漂移，結(jié)果重復(fù)性良好。
結(jié)論:本文使用 advancebio sec 130 , 7.8 × 300 mm, 2.7 µm 色譜柱，采用《中國藥典》現(xiàn)有球狀親水硅膠 sec 柱的分析方法，對 18 種抗生素進行了有關(guān)物質(zhì)分析，分離度與 tsk g2000swxl 相比提升 20%；傳統(tǒng) g-10 柱聚合物峰與主峰不能達到基線分離，使用 advancebio sec 130 , 7.8 × 300 mm, 2.7 µm 色譜柱，主峰相鄰峰與主峰基本能實現(xiàn)基線分離，獲得了出色的分離度及穩(wěn)定的結(jié)果 。該方法可以作為各個生產(chǎn)企業(yè)及檢測機構(gòu)抗生素質(zhì)量控制中有關(guān)物質(zhì) ii 檢項的參考。
干貨來襲：脂質(zhì)體輔料分類有哪些？
什么是防爆星三角降壓啟動?
解析科技-COD測定儀操作流程介紹
化妝品120ml液體定量灌裝機的工作原理
伏安特性測試儀怎么接線
Agilent 1260 液相色譜系統(tǒng)對18 種抗生素進行有關(guān)物質(zhì)分析
天然氣流量計如何安裝
大型中小學(xué)食堂、幼兒園食品安全檢測設(shè)備檢測方案
福斯FLOWSERVE閘閥的注意事項
旋噴泵的工作原理
碳纖維絲拉伸測試GB/T3362-2005
PM1，PM2.5，PM10,TSP檢測儀成套性
微型空氣質(zhì)量監(jiān)測站在城市大氣環(huán)境監(jiān)測中的運用
SMC氣缸的結(jié)構(gòu)及基本原理
25*10mmB1級橡塑保溫管用途
精密濾芯
你是如何正確保養(yǎng)原子熒光光度計的
325*890方盤蓋覆膜防靜電除塵濾筒
簡述低溫冷卻液循環(huán)泵的主要用途與性能
進口直讀光譜儀應(yīng)用領(lǐng)域的廣泛性
前言：抗生素是臨床常用的藥物之一，較易發(fā)生過敏反應(yīng)?？股刂械母叻肿泳酆衔镫s質(zhì)是引發(fā)過敏反應(yīng)的真正過敏原，因此嚴格控制抗生素藥物中的高分子聚合物含量具有重要意義。聚合物含量通常照分子排阻色譜法測定。目前大多采用葡聚糖凝膠柱，但此類填料的機械強度差且柱效低，因此聚合物分析填料逐漸發(fā)展為球狀親水硅膠。
《中國藥典》已有數(shù)個品種以有關(guān)物質(zhì) ii 的檢測項目形式收載了使用球狀親水硅膠 sec 的方法1 。目前市面上主要有兩種類型的球狀親水硅膠基質(zhì)：鍵合二醇基的硅膠 (usp l20) 和鍵合親水涂層的硅膠 (usp l59)。較為傳統(tǒng)的 usp l20 鍵合相由于存在較多的殘留硅醇基，通常需要較高離子強度的流動相以克服非特異性相互作用。而 agilent advancebio sec 色譜柱（l59 型）采用聚合物親水涂層，殘留硅醇基數(shù)目大幅減少，從而能夠有效抑制非特異性相互作用，實現(xiàn)聚集體的準(zhǔn)確定量分析。此外，2.7 μm的填料粒徑以及更大的孔容設(shè)計，都有助于進一步提升色譜分離效果。
實驗部分：試劑和樣品無水*與十二水合*均購自 sigma-aldrich 公司。實驗用水取自 merck millipore milli-q 超純水系統(tǒng)。磷酸鹽緩沖液：5 mmol/l na2hpo4:5 mmol/l nah2po4 (61:39)。所有樣品均為實際樣品。樣品均為市購產(chǎn)品。樣品溶解于流動相后過 0.22 µm 濾膜。樣品濃度均為 1 mg/ml。儀器和設(shè)備本實驗采用 agilent 1260 infinity ii 液相色譜系統(tǒng)，該系統(tǒng)配備二極管陣列檢測器。所用色譜柱為 agilent advancebio sec 130å, 7.8 × 300 mm, 2.7 µm（部件號：pl1180-5350）。樣品前處理準(zhǔn)確稱取 10 mg 抗生素粉末狀樣品于 10 ml 離心管內(nèi)，加入流動相 10 ml 后，超聲 1 分鐘。經(jīng) 0.22 µm 濾膜過濾后，取續(xù)濾液進樣分析。色譜條件色譜柱：advancebio sec 130å, 7.8 × 300 mm, 2.7 µm（部件號： pl1180-5350）流動相：5 mmol/l 磷酸鹽緩沖液（含 5% 乙腈），ph 7.0 進樣量：5 μl 柱溫：25 ℃ 流速：0.6 ml/min 等度運行檢測波長：254 nm
結(jié)果與討論：本實驗采用了 agilent advancebio sec 色譜柱和 agilent 1260 infinity ii 液相色譜系統(tǒng)對*、*、*、*、*、*、*、*、*鈉、*鈉、頭孢匹羅、*、*鈉、*鈉、*、*鈉、頭孢西林鈉、*鈉共 18 種抗生素進行有關(guān)物質(zhì)分析，并獲得了分離結(jié)果，
與 tsk g2000swxl 相比，advancebio sec 色譜柱擁有更好的分離度與分離效率，色譜柱塔板數(shù)是 tsk 同規(guī)格產(chǎn)品的近 2 倍。advancebio sec 色譜柱能耐受更高的壓力，機械強度更高，advancebio sec 色譜柱在前述條件下壓力約為 100 bar， advancebio sec 色譜柱耐壓 400 bar，*操作壓力不超過 200 bar，色譜柱壽命明顯延長。每份樣品均重復(fù)進樣 3 次，保留時間無明顯漂移，結(jié)果重復(fù)性良好。
結(jié)論:本文使用 advancebio sec 130 , 7.8 × 300 mm, 2.7 µm 色譜柱，采用《中國藥典》現(xiàn)有球狀親水硅膠 sec 柱的分析方法，對 18 種抗生素進行了有關(guān)物質(zhì)分析，分離度與 tsk g2000swxl 相比提升 20%；傳統(tǒng) g-10 柱聚合物峰與主峰不能達到基線分離，使用 advancebio sec 130 , 7.8 × 300 mm, 2.7 µm 色譜柱，主峰相鄰峰與主峰基本能實現(xiàn)基線分離，獲得了出色的分離度及穩(wěn)定的結(jié)果 。該方法可以作為各個生產(chǎn)企業(yè)及檢測機構(gòu)抗生素質(zhì)量控制中有關(guān)物質(zhì) ii 檢項的參考。
干貨來襲：脂質(zhì)體輔料分類有哪些？
什么是防爆星三角降壓啟動?
解析科技-COD測定儀操作流程介紹
化妝品120ml液體定量灌裝機的工作原理
伏安特性測試儀怎么接線
Agilent 1260 液相色譜系統(tǒng)對18 種抗生素進行有關(guān)物質(zhì)分析
天然氣流量計如何安裝
大型中小學(xué)食堂、幼兒園食品安全檢測設(shè)備檢測方案
福斯FLOWSERVE閘閥的注意事項
旋噴泵的工作原理
碳纖維絲拉伸測試GB/T3362-2005
PM1，PM2.5，PM10,TSP檢測儀成套性
微型空氣質(zhì)量監(jiān)測站在城市大氣環(huán)境監(jiān)測中的運用
SMC氣缸的結(jié)構(gòu)及基本原理
25*10mmB1級橡塑保溫管用途
精密濾芯
你是如何正確保養(yǎng)原子熒光光度計的
325*890方盤蓋覆膜防靜電除塵濾筒
簡述低溫冷卻液循環(huán)泵的主要用途與性能
進口直讀光譜儀應(yīng)用領(lǐng)域的廣泛性