bio-rad lynx rapid hrp antibody conjugation kit能夠使辣根過氧化物酶(hrp)快速標記在抗體或蛋白質(zhì)上。抗體標記溶液中zhuan利試劑的激活能讓hrp定向共價結(jié)合在抗體上。該試劑盒可用于在接近中性的ph值的溶液環(huán)境中的抗體/蛋白質(zhì)標記上hrp,并能保證100%抗體回收率的高結(jié)合效率。
試劑盒組分:
5 vials of 1mg lynx lyophilized hrp mix
1 vial lynx modifier reagent
1 vial lynx quencher reagent
推薦使用以下緩沖溶液準備抗體:
10-50mm amine-free buffer(例如hepes、mes、mops和磷酸鹽)ph范圍6.5-8.5或者中等濃度的tris緩沖液(< 20mm)。如果可能,避免含有nucleophilic成分的緩沖液,如amines和thiols(如thiomersal/thimerosal)),因為它們可能會與標記試劑發(fā)生反應(yīng)。edta和普通的非緩沖鹽和糖對結(jié)合效率影響很小。疊氮化na是hrp的不可逆抑制劑,避免引入疊氮化na。理想地用于標記的抗體的量應(yīng)該對應(yīng)于抗體與hrp之間1∶4和1∶1的摩爾比。考慮到分子量(160,000對40,000),這意味著對于4mg的辣根過氧化物酶,需要加入1-4mg的抗體。為獲得最佳結(jié)果,抗體體積應(yīng)達到1ml,濃度范圍為0.5-5.0mg/ml。
標記步驟:
1.向抗體樣品中每10μl抗體添加1μl的modifier reagent,并輕輕混合。
2.用移液管將混合的抗體-modifier reagent樣品直接移至lynx lyophilized hrp mix中,輕輕上下吹打兩次以重懸。
3.蓋好蓋子,然后在室溫(20-25℃)下孵育3小時,也可以孵育過夜。
4.孵育后,每10μl抗體添加1μl的quencher reagent。使用前靜置30分鐘。
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名稱
規(guī)格
lnk004p
lynx rapid hrp antibody conjugation kit
5 conjugations for 4mg antibody
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