Eclipse Plus C8柱改進藥物HPLC分析的峰形和效率
引言由于沒有一種柱子可以適用于所有分析，所以人們一直在研究新的hplc液相色譜柱技術?？茖W家們一直都在尋找有助于創新、提高效率，并更快獲得良好結果的更好、更快的方法。例如，在制藥行業，藥物的研究和開發需要更高效的色譜柱，以增加在一定時間內進行準確分析的數量。更快地篩選出潛在的藥物非常有意義。另外，政府和行業規范對儀器和技術的要求也越來越嚴格。用于食品的來自空氣和水（水，空氣和食品中）的每一種物質都要嚴格檢查其質量和安全性。高質量hplc柱是耐用的儀器和方法的必要組成部分，有了所有這些，才能獲得可靠的結果。zorbax eclipse plus c8 柱有幾種填料粒徑和柱尺寸，是提高效率的良好工具。它們分離酸性、中性和堿性化合物都有良好的峰形。是方法開發的色譜柱。
eclipse plus c8的選擇性色譜柱的選擇要考慮到一些因素。選擇性是進行色譜柱選擇最重要的因素之一。選擇性系數(α)是兩個峰的相對保留值：α = k2 / k1在這里 k2 和 k1 分別是第二個洗脫出來的峰和第一峰的保留因子，也稱容量因子。如果這兩個峰一起被洗脫，α 為 1 ；對這兩個緊密相鄰的峰來說，選擇性接近１。選擇性，或峰間距，可以通過改變溫度、流動相或固定相（色譜柱）進行調節。因為選擇性體現了分析物與固定相/流動相之間的相互作用，所以難以理解、也很難預測，常常需要通過實驗進行優化。有各種柱子可供選擇，這是改變α的有力而容易的辦法，尤其是因穩定性、溶解度、ph 或其它局限無法改變流動相時。圖1顯示了在同樣的色譜條件下，eclipseplus c8柱、eclipse plus c18 柱，和 eclipse xdbc8 柱的不同選擇性。eclipse plus c8 柱與 eclipsexdb-c8 柱相比，雖然對三種非常難分離的化合物來說，α僅改變了6%，但分離度增加了1倍，從1.23增至2.42。
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這些柱子都有相似之處，如，同樣以zorbax硅膠為基質，都采用的是安捷倫控制的生產技術，因此，可以預計其洗脫順序也比較相似，如圖所示。但它們之間也有明顯的不同，例如，eclipse plus柱和eclipse xdb柱采用的硅膠處理和鍵合技術不同，c18和c8的官能團也不同。這些差異反映為選擇性的不同，進而將改善分離度。對于a接近1的緊密相鄰峰，a的微小變化將對分離度產生極大的影響，例如在這個例子中，a 從 1.07變為1.14，分離度就從1.15增加到2.42。
快速分離(rr)小粒徑的填料與大粒徑填料相比，優勢就是有更高的柱效。用這一特點可以明顯提高效率。填充了小粒徑填料的較短色譜柱，在保持了用長柱能得到的足夠分離度的同時，顯著加快了分析速度。圖3、4、5是應用實例，用更短的高分離度快速(rr) (4.6 x 50 mm,3.5 µm)柱代替eclipse plus c8分析柱(4.6 x 150 mm,5 µm)。直接或“plug & play”替代都在保持足夠分離
度的同時，明顯縮短了分析時間，分析時間與柱長成正比。小粒徑填料柱還明顯提高了靈敏度。表1 列出了這三個例子中分析柱和 rr 柱分離時最后洗脫峰的峰高、峰面積和變化的百分比。由于進樣量相等，用兩個柱子得到的峰面積都相同，但是rr柱的峰高（靈敏度測量[信噪比]）卻要高 50%。三張圖中還列出了這些例子的系統反壓。rr柱因較小粒徑(3.5 vs. 5 µ)造成的高反壓問題，通過更短的柱長(50 vs. 150 mm)得到了彌補。分析柱(150 mm)和 50-mm rr 柱的反壓相等，證實了安捷倫rr柱的plug & play能力。所有的壓力都在安捷倫1100和1200系列液相色譜儀的操作范圍內。如果需要，還可以選擇較高的流速，進行更快的分析。eclipse plus c8柱有1.8、3.5和5 µm三種粒徑，適用于分析、高分離度快速和快速 lc 分析。表 2 列出了可供選擇的各種配置。
堿性化合物的出色峰形eclipse plus柱（c8和c18）的顯著的特點是分離各種類型樣品：酸性、堿性和中性樣品，都能得到出色的峰形。在上述例子的各圖中都列出了用美國藥典拖尾因子計算表示的峰形。每個例子中，都接近于理想狀態(1.0)。高性能+峰形，柱效和分離度+均歸功于全程嚴格控制的、改進的硅膠生產和鍵合技術。堿性化合物（特別是含氨基的分子）的高效反相色譜分離經常很困難。在低ph條件下(ph ＜ 3)，堿發生質子化(bh+)，因而水溶性很強，保留較差。在ph 7時，某些氨基可能仍然質子化，而其它的則失去其質子(b)。硅膠上沒有反應硅醇基呈離子型(sio-)，將與質子化的離子樣品發生相互作用。這種離子交換二級反應將導致峰拖尾。在低 ph 條件下，硅醇基未離子化(sioh)，與堿性分析物不發生相互作用。圖６顯示了在ph 7時，同樣條件下分析２個堿性化合物的實例。這兩個已知化合物，阿密曲替林和右mei沙芬，由于在中性 ph 條件下部分離子化，在 b 和 bh+之間互相轉化，用其它柱子分離時拖尾非常嚴重。但使用eclipse plus c8后，峰形非常好。eclipse plus進行了zorbax硅膠處理、封端和鍵合，降低了離子化硅醇基的相互作用，顯著改善了峰形。
關鍵詞：色譜柱 液相色譜儀
用555定時器的時間繼電器電路
智能型離子色譜的特點主要體現在這幾個方面
煙氣分析儀使用的注意事項有幾點
水分測定儀校準規定
金屬保溫板是一種由金屬材料制成的外墻保溫裝飾材料
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日本SMC電磁閥閥芯的壓力怎么才正常運行
防火涂料認證的保持、變更、擴大、暫停
全自動數控車床使用前的注意事項，簡單明了
生活污水處理設備的維護
eclipse plus c8的選擇性色譜柱的選擇要考慮到一些因素。選擇性是進行色譜柱選擇最重要的因素之一。選擇性系數(α)是兩個峰的相對保留值：α = k2 / k1在這里 k2 和 k1 分別是第二個洗脫出來的峰和第一峰的保留因子，也稱容量因子。如果這兩個峰一起被洗脫，α 為 1 ；對這兩個緊密相鄰的峰來說，選擇性接近１。選擇性，或峰間距，可以通過改變溫度、流動相或固定相（色譜柱）進行調節。因為選擇性體現了分析物與固定相/流動相之間的相互作用，所以難以理解、也很難預測，常常需要通過實驗進行優化。有各種柱子可供選擇，這是改變α的有力而容易的辦法，尤其是因穩定性、溶解度、ph 或其它局限無法改變流動相時。圖1顯示了在同樣的色譜條件下，eclipseplus c8柱、eclipse plus c18 柱，和 eclipse xdbc8 柱的不同選擇性。eclipse plus c8 柱與 eclipsexdb-c8 柱相比，雖然對三種非常難分離的化合物來說，α僅改變了6%，但分離度增加了1倍，從1.23增至2.42。
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這些柱子都有相似之處，如，同樣以zorbax硅膠為基質，都采用的是安捷倫控制的生產技術，因此，可以預計其洗脫順序也比較相似，如圖所示。但它們之間也有明顯的不同，例如，eclipse plus柱和eclipse xdb柱采用的硅膠處理和鍵合技術不同，c18和c8的官能團也不同。這些差異反映為選擇性的不同，進而將改善分離度。對于a接近1的緊密相鄰峰，a的微小變化將對分離度產生極大的影響，例如在這個例子中，a 從 1.07變為1.14，分離度就從1.15增加到2.42。
快速分離(rr)小粒徑的填料與大粒徑填料相比，優勢就是有更高的柱效。用這一特點可以明顯提高效率。填充了小粒徑填料的較短色譜柱，在保持了用長柱能得到的足夠分離度的同時，顯著加快了分析速度。圖3、4、5是應用實例，用更短的高分離度快速(rr) (4.6 x 50 mm,3.5 µm)柱代替eclipse plus c8分析柱(4.6 x 150 mm,5 µm)。直接或“plug & play”替代都在保持足夠分離
度的同時，明顯縮短了分析時間，分析時間與柱長成正比。小粒徑填料柱還明顯提高了靈敏度。表1 列出了這三個例子中分析柱和 rr 柱分離時最后洗脫峰的峰高、峰面積和變化的百分比。由于進樣量相等，用兩個柱子得到的峰面積都相同，但是rr柱的峰高（靈敏度測量[信噪比]）卻要高 50%。三張圖中還列出了這些例子的系統反壓。rr柱因較小粒徑(3.5 vs. 5 µ)造成的高反壓問題，通過更短的柱長(50 vs. 150 mm)得到了彌補。分析柱(150 mm)和 50-mm rr 柱的反壓相等，證實了安捷倫rr柱的plug & play能力。所有的壓力都在安捷倫1100和1200系列液相色譜儀的操作范圍內。如果需要，還可以選擇較高的流速，進行更快的分析。eclipse plus c8柱有1.8、3.5和5 µm三種粒徑，適用于分析、高分離度快速和快速 lc 分析。表 2 列出了可供選擇的各種配置。
堿性化合物的出色峰形eclipse plus柱（c8和c18）的顯著的特點是分離各種類型樣品：酸性、堿性和中性樣品，都能得到出色的峰形。在上述例子的各圖中都列出了用美國藥典拖尾因子計算表示的峰形。每個例子中，都接近于理想狀態(1.0)。高性能+峰形，柱效和分離度+均歸功于全程嚴格控制的、改進的硅膠生產和鍵合技術。堿性化合物（特別是含氨基的分子）的高效反相色譜分離經常很困難。在低ph條件下(ph ＜ 3)，堿發生質子化(bh+)，因而水溶性很強，保留較差。在ph 7時，某些氨基可能仍然質子化，而其它的則失去其質子(b)。硅膠上沒有反應硅醇基呈離子型(sio-)，將與質子化的離子樣品發生相互作用。這種離子交換二級反應將導致峰拖尾。在低 ph 條件下，硅醇基未離子化(sioh)，與堿性分析物不發生相互作用。圖６顯示了在ph 7時，同樣條件下分析２個堿性化合物的實例。這兩個已知化合物，阿密曲替林和右mei沙芬，由于在中性 ph 條件下部分離子化，在 b 和 bh+之間互相轉化，用其它柱子分離時拖尾非常嚴重。但使用eclipse plus c8后，峰形非常好。eclipse plus進行了zorbax硅膠處理、封端和鍵合，降低了離子化硅醇基的相互作用，顯著改善了峰形。
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