OE-33 人食管腺癌細胞傳代/復蘇操作技巧
oe-33 人食管腺癌細胞
,oe33
貨號：yj-h422
價格： 2500.0
規格： 1*106
細胞介紹
1993年從一位73歲的白人女性原發腫瘤中發現barrett食管腺癌；文獻中描述細胞在裸鼠體內產生腫瘤；細胞系也稱為jroecl33.
細胞特性
1）來源：食管腺癌
2）形態：上皮樣貼壁生長
3）含量：>1x106細胞數
4）規格：t25瓶或者1ml凍存管包裝
5）用途：僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1ml凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
（2）t25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將t25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2）請在4或5x顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8ml，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議t25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備1640（推薦yj-0002）培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%dmso，現用現配。
二．細胞處理：
1）凍存細胞的復蘇：
將含有1ml細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6ml完全培養基的離心管中混合均勻。在1000rpm條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的pbs潤洗細胞1-2次。
2.加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mm edta于培養瓶中（t25瓶1-2ml，t75瓶2-3ml），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%fbs的培養基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000rpm條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2ml培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新t25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
下面t25瓶為例；
1.細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2.1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。
3.將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。
注意事項
1.收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
5.客戶在細胞培養過程中，有技術問題可以聯系咨詢技術售后，我們隨時給予解答。
從2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫學實驗外包及論文潤色服務，協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年，是您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯系。
實驗代做服務：
試劑盒免費代檢測
石蠟冰凍切片tunel凋亡熒光
掃描電鏡服務
實驗室代做實驗項目
透射電鏡服務實驗服務
石蠟/冰凍切片tunel凋亡
核仁組成區嗜銀-agnor染色實驗服務
細胞熒光染料標記檢測實驗
rna結合蛋白免疫沉淀（rip）實驗代做
he染色
六胺銀法染色實驗服務
天狼猩紅染色實驗服務
網狀纖維染色銀染實驗服務
染色質免疫沉淀分析(clip)實驗服務
免疫組化ihc染色實驗服務
油紅o染色實驗服務
atp/adp檢測實驗服務
蛋白雙向(2-d)電泳實驗服務
免疫共沉淀（co-ip）實驗代做
免疫細胞化學icc實驗服務
pkc活性檢測實驗
免疫共沉淀（chirp）實驗
蛋白雙向2d-wb電泳實驗服務
端粒酶活性檢測實驗
探針合成實驗服務
nf-kb p65活性檢測實驗
喹諾酮類快速檢測試劑盒
雞傳染性法氏囊病病毒vp2抗體診斷試劑盒
高速開箱機的日常清潔護理工作如何做呢？
鹵化丁基橡膠塞墊片穿刺落屑測試儀 產品參數解析 山東賽銳特
對于手動單道可調式移液器大龍儀器特點您了解多少？
S31608不銹鋼材料，你準備好了嗎 百科
千億融資機會！成都給了哪些環保項目機會？
OE-33 人食管腺癌細胞傳代/復蘇操作技巧
了解FESTO比例調節閥功效和封閉密封特性
數控折彎機模具提高壽命的辦法有什么
為什么不銹鋼日本SMC氣缸會出現了斷裂的形象呢
隔爆型40WLED防爆燈 40WLED防爆泛光燈
超聲波縫紉機操作維修
如何更好的解決熱電偶抗干擾問題呢？
選購臥式端面銑床時需要考慮好以下方面
氫型變色樹脂在廢水處理中的發展空間
阻尼減震器駱盈專業生產阻尼減震器
丹佛斯壓力傳感器的原理和常用的3種檢測方法
蘇州威爾SHP-80L生化培養箱溫度可至-10度尺寸容積可按要求制作
果蔬呼吸測定儀怎么用·2022儀器操作介紹·果蔬呼吸測定儀怎么用
無錫冠亞加熱制冷設備SUNDI-125W
防爆配電箱維修過程
,oe33
貨號：yj-h422
價格： 2500.0
規格： 1*106
細胞介紹
1993年從一位73歲的白人女性原發腫瘤中發現barrett食管腺癌；文獻中描述細胞在裸鼠體內產生腫瘤；細胞系也稱為jroecl33.
細胞特性
1）來源：食管腺癌
2）形態：上皮樣貼壁生長
3）含量：>1x106細胞數
4）規格：t25瓶或者1ml凍存管包裝
5）用途：僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1ml凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
（2）t25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將t25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2）請在4或5x顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8ml，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議t25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備1640（推薦yj-0002）培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%dmso，現用現配。
二．細胞處理：
1）凍存細胞的復蘇：
將含有1ml細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6ml完全培養基的離心管中混合均勻。在1000rpm條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的pbs潤洗細胞1-2次。
2.加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mm edta于培養瓶中（t25瓶1-2ml，t75瓶2-3ml），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%fbs的培養基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000rpm條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2ml培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新t25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
下面t25瓶為例；
1.細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2.1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。
3.將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。
注意事項
1.收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
5.客戶在細胞培養過程中，有技術問題可以聯系咨詢技術售后，我們隨時給予解答。
從2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫學實驗外包及論文潤色服務，協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年，是您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯系。
實驗代做服務：
試劑盒免費代檢測
石蠟冰凍切片tunel凋亡熒光
掃描電鏡服務
實驗室代做實驗項目
透射電鏡服務實驗服務
石蠟/冰凍切片tunel凋亡
核仁組成區嗜銀-agnor染色實驗服務
細胞熒光染料標記檢測實驗
rna結合蛋白免疫沉淀（rip）實驗代做
he染色
六胺銀法染色實驗服務
天狼猩紅染色實驗服務
網狀纖維染色銀染實驗服務
染色質免疫沉淀分析(clip)實驗服務
免疫組化ihc染色實驗服務
油紅o染色實驗服務
atp/adp檢測實驗服務
蛋白雙向(2-d)電泳實驗服務
免疫共沉淀（co-ip）實驗代做
免疫細胞化學icc實驗服務
pkc活性檢測實驗
免疫共沉淀（chirp）實驗
蛋白雙向2d-wb電泳實驗服務
端粒酶活性檢測實驗
探針合成實驗服務
nf-kb p65活性檢測實驗
喹諾酮類快速檢測試劑盒
雞傳染性法氏囊病病毒vp2抗體診斷試劑盒
高速開箱機的日常清潔護理工作如何做呢？
鹵化丁基橡膠塞墊片穿刺落屑測試儀 產品參數解析 山東賽銳特
對于手動單道可調式移液器大龍儀器特點您了解多少？
S31608不銹鋼材料，你準備好了嗎 百科
千億融資機會！成都給了哪些環保項目機會？
OE-33 人食管腺癌細胞傳代/復蘇操作技巧
了解FESTO比例調節閥功效和封閉密封特性
數控折彎機模具提高壽命的辦法有什么
為什么不銹鋼日本SMC氣缸會出現了斷裂的形象呢
隔爆型40WLED防爆燈 40WLED防爆泛光燈
超聲波縫紉機操作維修
如何更好的解決熱電偶抗干擾問題呢？
選購臥式端面銑床時需要考慮好以下方面
氫型變色樹脂在廢水處理中的發展空間
阻尼減震器駱盈專業生產阻尼減震器
丹佛斯壓力傳感器的原理和常用的3種檢測方法
蘇州威爾SHP-80L生化培養箱溫度可至-10度尺寸容積可按要求制作
果蔬呼吸測定儀怎么用·2022儀器操作介紹·果蔬呼吸測定儀怎么用
無錫冠亞加熱制冷設備SUNDI-125W
防爆配電箱維修過程