我現(xiàn)在要做醋酸菌的發(fā)酵試驗(yàn),尋找理想的生產(chǎn)果醋的發(fā)酵條件。我現(xiàn)在正在將冷凍保藏的醋酸菌進(jìn)行活化,是在斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)的,我想盡量縮短試驗(yàn)的時(shí)間,不知道這一步活化是不是也有擴(kuò)培的作用,做完這一步能不能直接將活化完的菌種接種在三角燒瓶中的增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行搖床振蕩培養(yǎng),使醋酸菌產(chǎn)酸,并在這一過(guò)程中測(cè)量一系列指標(biāo),用單因素試驗(yàn)確定出影響因素的水平,然后再轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐中進(jìn)行正交試驗(yàn)找出理想的發(fā)酵條件。
希望師兄師姐和各位前輩們給我些指點(diǎn)吧!
你從冷凍狀態(tài)將菌株轉(zhuǎn)接到斜面上,已經(jīng)是活化菌種了。不過(guò)你要接種到三角瓶,用接種環(huán)?接種量會(huì)有較大的差別,不如液體培養(yǎng)后接種菌液,比較均一。你的思路是正確的,一般都是先做單因子試驗(yàn),摸索好了條件再上罐。
非常感謝能收到回復(fù)!你的意思是進(jìn)行兩次三角燒瓶擴(kuò)培效果比較好是吧,先用接種環(huán)接種到一級(jí)增殖培養(yǎng)基中搖床,然后再把這次擴(kuò)培出的菌株用移液管接種到二級(jí)增殖培養(yǎng)基中再搖床。我也想把試驗(yàn)做的好一些,但是就是不知道時(shí)間是否夠用,所以想縮短一下時(shí)間。我還想問(wèn)一下,一般擴(kuò)培的培養(yǎng)時(shí)間是不是應(yīng)該比活化的時(shí)間要長(zhǎng)呢?再次謝謝了!
我在做氨基酸的發(fā)酵試驗(yàn),感覺(jué)流程和你的有些相似。
我是這么做的 優(yōu)化斜面培養(yǎng)基就是活化的培養(yǎng)基,然后優(yōu)化種子培養(yǎng)基種子搖瓶用最后是發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的控制。
我看你的實(shí)驗(yàn)是不是現(xiàn)在在優(yōu)化種子培養(yǎng)基這一步,先單因素然后在正交,不過(guò)我個(gè)人覺(jué)得這樣時(shí)間會(huì)有點(diǎn)久。
活化時(shí)間不是應(yīng)該根據(jù)菌體生長(zhǎng)情況而定么,需要一個(gè)較大的od值然后轉(zhuǎn)入種子或發(fā)酵培養(yǎng)基么。
可以先用種子培養(yǎng)基,再轉(zhuǎn)入發(fā)酵培養(yǎng)基
但是有一個(gè)問(wèn)題,醋酸菌發(fā)酵后的菌液可以測(cè)od值嗎?
為什么不可以呢,我做氨基酸發(fā)酵時(shí)是以取發(fā)酵液0.5ml與雙蒸水9.5ml,稀釋100倍,用分光光度計(jì)在600nm下測(cè)其od。難道lz是考慮發(fā)酵液的顏色太深而對(duì)實(shí)驗(yàn)有影響么
多活化一代
我認(rèn)為問(wèn)題不太大 因?yàn)槲規(guī)熃阕霭被岚l(fā)酵時(shí)發(fā)酵液顏色也蠻深的 lz可以對(duì)此問(wèn)題問(wèn)下高人
為什么不可以呢,我做氨基酸發(fā)酵時(shí)是以取發(fā)酵液0.5ml與雙蒸水9.5ml,稀釋100倍,用分光光度計(jì)在600nm下測(cè)其od。難道lz是考慮發(fā)酵液的顏色太深而對(duì)實(shí)驗(yàn)有影響么
還有一個(gè)問(wèn)題,接種量如何控制,因?yàn)橐龊脦捉M試驗(yàn),隨著時(shí)間的不同,菌體的數(shù)量肯定會(huì)增加或減少,培養(yǎng)液中的菌體密度會(huì)不一樣,就算每次取用的菌液體積一樣,接種量也會(huì)不一樣。難道要每次接種前測(cè)一下od值嗎?
好幾組實(shí)驗(yàn),是平行實(shí)驗(yàn)么?好幾組實(shí)驗(yàn)的目的是要優(yōu)化培養(yǎng)基還是選取接種量?
不是平行試驗(yàn),時(shí)間來(lái)不及了。好幾組試驗(yàn)是要探討不同的因素對(duì)醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)酸的影響,接種量我想作為一個(gè)不變的因素,并不是要選取接種量。比如說(shuō),保持接種量一樣的情況下分別設(shè)置不同的溫度進(jìn)行發(fā)酵,看哪個(gè)溫度發(fā)酵產(chǎn)酸最多。
我在配制醋酸菌的液體增殖培養(yǎng)基的時(shí)候用的電熱套加熱溶解酵母膏、葡萄糖這些培養(yǎng)基的成分,一開(kāi)始沒(méi)殺菌沒(méi)接種的時(shí)候還是透明的澄清的,但是當(dāng)加完無(wú)水乙醇接種的時(shí)候突然發(fā)現(xiàn)三角瓶中有沉淀物,這是怎么回事?難道酵母膏也要像瓊脂一樣要煮沸嗎?
接種量不變,以不同的溫度進(jìn)行發(fā)酵,測(cè)定其中的od值和產(chǎn)物的含量作為衡量溫度的指標(biāo)。
我也做果醋,我是這樣做的:先從-80℃凍管中接到斜面試管活化,培養(yǎng)一定時(shí)間,放入4℃保存(保質(zhì)期在3各月),發(fā)酵時(shí)再?gòu)?℃轉(zhuǎn)接到新鮮的斜面培養(yǎng)基中活化,培養(yǎng)至一定時(shí)間就可以接種種子培養(yǎng)基擴(kuò)培 了 。。
樓主你好!我現(xiàn)在有和您一樣的問(wèn)題:我現(xiàn)在要做醋酸菌的發(fā)酵試驗(yàn),尋找理想的生產(chǎn)果醋的發(fā)酵條件。我現(xiàn)在正在將冷凍保藏的醋酸菌進(jìn)行活化,是在斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)的,我想盡量縮短試驗(yàn)的時(shí)間,不知道這一步活化是不是也有擴(kuò)培的作用,做完這一步能不能直接將活化完的菌種接種在三角燒瓶中的增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行搖床振蕩培養(yǎng),使醋酸菌產(chǎn)酸,并在這一過(guò)程中測(cè)量一系列指標(biāo),用單因素試驗(yàn)確定出影響因素的水平,然后再轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐中進(jìn)行正交試驗(yàn)找出理想的發(fā)酵條件。不知您現(xiàn)在是否有思路了,請(qǐng)教一下!
還有不知您的這個(gè)問(wèn)題:“接種量如何控制,因?yàn)橐龊脦捉M試驗(yàn),隨著時(shí)間的不同,菌體的數(shù)量肯定會(huì)增加或減少,培養(yǎng)液中的菌體密度會(huì)不一樣,就算每次取用的菌液體積一樣,接種量也會(huì)不一樣。難道要每次接種前測(cè)一下od值嗎?”有沒(méi)思路?
我也有個(gè)糾結(jié)的問(wèn)題,用od測(cè)發(fā)酵液生物量的時(shí)候,對(duì)照液用培養(yǎng)基還是蒸餾水啊?非常急啊!!!!
個(gè)人覺(jué)得測(cè)od ,標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)該是培養(yǎng)基,曾經(jīng)看文獻(xiàn)里好像有這樣介紹的~
不好意思,好久不上了,現(xiàn)在我已經(jīng)不做這方面的試驗(yàn)了,至于思路什么的已經(jīng)好久不想了,建議還是去請(qǐng)教一下其他專業(yè)人士吧,實(shí)在不好意思了!
醋酸菌目前國(guó)內(nèi)外研究的比較透徹,連產(chǎn)品培養(yǎng)基都開(kāi)發(fā)了,商品名為醋發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)鹽,你可以網(wǎng)上搜搜。
你從冷凍狀態(tài)將菌株轉(zhuǎn)接到斜面上,已經(jīng)是活化菌種了。不過(guò)你要接種到三角瓶,用接種環(huán)?接種量會(huì)有較大的差別,不如液體培養(yǎng)后接種菌液,比較均一。你的思路是正確的,一般都是先做單因子試驗(yàn),摸索好了條件再上罐。
你好!我現(xiàn)在正在培養(yǎng)醋酸菌,想對(duì)培養(yǎng)液中的菌群濃度做計(jì)數(shù),就是明確(或者粗略)得出單位體積溶液里菌株的數(shù)量。請(qǐng)問(wèn)大俠有什么簡(jiǎn)單有效的方法嗎?
我查閱的資料里有提及用梯度菌液平板涂布法,太這個(gè)方法工作量太大,用時(shí)太長(zhǎng),所以我想請(qǐng)教一下還有沒(méi)有像酵母菌血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)之類的簡(jiǎn)單的方法
樓主,我現(xiàn)在也正在培養(yǎng)醋酸菌,我想請(qǐng)教一下你是什么計(jì)數(shù)方法的?我想通過(guò)一種計(jì)數(shù)方法就可以明確(或者粗略)得出單位體積溶液里菌株的數(shù)量。比如像酵母菌血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)之類的簡(jiǎn)單有效的方法。
如果是平板計(jì)數(shù)法,工作量太大,所以想找一種簡(jiǎn)單有效的方法。
如果是平板計(jì)數(shù)法 ...
您好,我現(xiàn)在也做醋酸菌簡(jiǎn)單計(jì)數(shù),想請(qǐng)問(wèn)下您有沒(méi)有找到簡(jiǎn)單快捷的計(jì)數(shù)方法?
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