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靈敏度是決定質譜成像檢測的關鍵性能指標

質譜成像技術在科學研究、臨床病理分析等諸多領域有著巨大的價值,已經成為質譜研究的一大熱點,基于maldi、ap-maldi、desi、sims等離子源的質譜成像技術飛速發展。對于科研工作者而言,如此多的質譜成像技術,究竟哪一種更適合自己的研究方向,很難搞清楚。本次,我們看一看質譜成像的關鍵性能之一:檢測限(靈敏度)。
靈敏度是決定質譜儀檢測的關鍵性能指標,它意味著質譜儀最少能發現多少離子(通俗地說,就是探測到多少個離子之后能夠形成質譜圖出峰)。對于質譜成像而言,我們不僅要研究高豐度分子成像,在很多應用中,比如癌癥細胞分型研究中,我們還要研究低豐度生物標志物,這就對質譜儀的靈敏度提出了要求。
決定靈敏度的因素有很多,這里只談談比較關鍵的因素:
離子化效率
質譜儀的兩大核心結構,一是離子源,作用是將樣本氣化和電離;一是質量分析器,把質荷比不同的離子分開,并檢測到。
所謂離子化效率就是能夠將樣本離子化到什么程度。只有將足夠多的樣本分子離子化,才能更方便地被離子探測器檢測到。
離子源發展至今少說也有上百種,最后被市場認可的離子源,離子化效率都比較高。但不同的離子源針對的范圍不同。比如maldi,在有合適基質時,其能保證無論大分子還是小分子,都能實現非常高的離子化效率,這也是maldi擁有高靈敏度的原因之一。因為原理相似,ap-maldi的離子化效率也能得到很好的保證,并且在小分子離子化方面尤其出色。而desi、sims等離子源,則在小分子離子化方面優勢明顯,在大分子方面,離子化能力較maldi差。
離子傳輸效率
離子源把樣本氣化和離子化之后,這些離子要想辦法導入到質量分析器中。作為內源(真空中)maldi所生產的離子由于是在質譜儀內真空環境下產生,離子傳輸效率較高,而外源性離子源,如ap-maldi、desi等,在大氣環境下生成的離子需要傳輸入真空環境,往往只有1%以下的離子被傳輸到質量分析器中,對質譜成像技術的靈敏度產生很大的影響,只能依靠與其相配合的質量分析器的能力彌補。比如,我們常見ap-maldi連接離子阱質譜儀,能夠實現較高的質量分辨率,并且通過較長檢測時間實現較高的靈敏度,但會在質譜成像的速率上大打折扣。
基質(雜質)干擾
質譜儀是高精密的儀器,它是分離物質的極限,這種極限是基于樣品足夠干凈的基礎上的,所以我們常見到色譜-質譜聯用等技術,就是先期對樣品中的基質去除,然后對相對純凈的目標物進行分離。
質譜成像中,基質干擾同樣會困擾質譜儀本身。質譜成像是對生物組織樣本進行原位分析的技術,其樣本的凈化、提純等前處理過程較少,意即沒有了色譜分離的幫助,因而基質干擾會對質譜成像的靈敏度有較大的影響。一些抗基質力較弱的質譜儀,比如離子阱質譜,在質譜成像時表現出的抗基質力會比較差。
離子探測器
如果把質譜儀的工作流程看作流水線,離子探測器相當于流水線的道關口:質檢。只有前面的各個環節做得足夠好,質檢環節才能輕松些,否則,離子探測器也會無能為力。
不同類型的質譜儀使用了各自的離子探測器技術,以適配質譜儀流水線。這些離子探測器的工作方式和探測能力,將大大地限制質譜成像的靈敏度。一般而言,普通質譜儀的離子探測器主要為常規分析服務,并沒有考慮到質譜成像的特殊需求,如果連接了外接離子源,往往無法達成高性能成像(通俗地說,就是理論上標稱的內容,實際上根本看不到)。而內置離子源的質譜儀,如果是專為成像而制作,其會充分考慮質譜成像的需求,匹配適合的離子探測器和數據采集器,從而達到高靈敏探測的效果。比如融智生物的quantof質譜成像系統,創新性地使用了光電混合離子探測器和瞬態數字轉換器,從而大幅提升了離子探測器檢測離子的靈敏度。
綜上,對于科研工作者而言,找到一臺適合自己的質譜成像儀器,不能光看它們的理論極限,而要看儀器能夠體現性來的性能。成像質譜要想發揮高性能,并不是一個離子源能決定的,而是質譜儀從離子源到質量分析器,再到數據采集和處理,每個環節都做到,達到整體性能,最終才能得到高質量的質譜成像結果。目前,質譜成像發展時間尚短,一些質譜成像部件因為價格便宜、裝配靈活,從而適合科研人員快速裝備和開展研究。但在將來,質譜成像一定會向高性能整機、成套解決方案的方向發展。

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