蔬果中維生素C含量的檢測(cè)方法
維生素c又叫抗壞血酸(ascorbicid)，廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果、蔬菜中含量較多。是一種水溶性小分子生物活性物質(zhì)，也是人體需要量大的一種維生素。維生素c具有還原性(其結(jié)構(gòu)式如圖1)，可以與許多氧化劑發(fā)生氧化還原反應(yīng)，因此可以利用其還原性測(cè)定維生素c的含量。目前食品中測(cè)定維生素c含量的方法主要有dian量法，是利用維生素c的氧化還原性為基礎(chǔ)的一種氧化還原方法。岡其酸度不易把握dian需要標(biāo)定且易揮發(fā)，而vc不易穩(wěn)定保存，使測(cè)定結(jié)果易出現(xiàn)偏差，且這種方法不適合微量分析；國(guó)標(biāo)gb/t6195-1986是采用2,6一二氯靛酚滴定法。利用樣品溶液由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)榉奂t色來(lái)辨別其滴定終點(diǎn)的到達(dá)。但是多數(shù)水果、蔬菜樣品其提取液都具有一定的色澤而導(dǎo)致滴定終點(diǎn)不明顯，使測(cè)定準(zhǔn)確度降低。另外還有熒光光譜分析法 j、紫外一可見(jiàn)分光度法、色譜法、電化學(xué)法等，這些方法都存在著一定的局限性，如操作過(guò)程復(fù)雜，所用試劑不穩(wěn)定，速度慢、背景¨干擾大。近年來(lái)，建立的測(cè)定vc的其他方法還有催化動(dòng)力學(xué)和光度法相結(jié)合的方法，及vc傳感器測(cè)定方法，固定ph滴定法等。
該論文將對(duì)蔬菜、水果常用的維生素c含量的檢測(cè)方法進(jìn)行綜述、比較。
1原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法問(wèn)接測(cè)定維生素c的含量，是利用維生素c可以與一些金屬離子發(fā)生氧化還原反應(yīng)，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)掉的金屬離子的量，進(jìn)而間接計(jì)算出維生素c的含量。
1.1以銀離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法
以銀離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法，是利用維生素c分子中的有二烯醇基具強(qiáng)還原性，可被xiaosuan銀氧化為去氫維生素c，同時(shí)產(chǎn)生黑色銀沉淀
沉淀經(jīng)離心分離后，將分離得到的沉淀用xiaosuan溶解后，再利用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定銀離子的含量，從而接測(cè)得維生素c含量，具體測(cè)定方法如下：
配制一系列濃度的維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液，依次吸取一定量的維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液置于10ml離心管中，分別加入2ml(1mg/ml) ag+標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后加水使總體積為4ml，搖勻，在室溫下避光放置35min離心分離棄去上清液，用2ml超純水洗滌沉淀3次，然后用l:1的濃xiaosuan3ml溶解沉淀，移入50ml的容量瓶中，加水稀釋至刻度。噴入空氣-乙炔火焰分別測(cè)定其吸光度，以維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以測(cè)得的吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。后將處理過(guò)的待測(cè)樣按上述方法測(cè)定其維生素c含量。
上述方法巾維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品的配制都是利用2％的檸檬酸作為溶劑，并在棕色瓶中保存，原因是維生素c在溶液中不穩(wěn)定，遇氧氣、光、熱、堿性物質(zhì)易受破壞，而在適當(dāng)?shù)乃嵝詶l件下比較穩(wěn)定，用2％的檸檬酸溶液來(lái)配制維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液，減緩了維生素c被氧化的速度，同時(shí)消除了一定外界因素的十?dāng)_，使得測(cè)定結(jié)果比較穩(wěn)定。
1.2 以銅離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法
文獻(xiàn)中報(bào)道了以銅離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法。該方法也是利用維生素c在酸性介質(zhì)中維生素c可將cu2+定量的還原為cu+，然后cu+與scn-反應(yīng)生成cuscn沉淀，在高速離心機(jī)下有效地分離出cuscn沉淀，洗滌后再經(jīng)濃xiaosuan溶解，用原子吸收法測(cè)定沉淀中的含銅量，即可推知樣品中維生素c的含量。具體測(cè)定方法如下：
分別吸取1ml配制的含一定量維生素c的標(biāo)準(zhǔn)溶液(隨配隨用)(分別含維生素c 50、100、200、300、400、500 µg)和樣品提取液，依次放置于已編號(hào)的15ml離心管中，各加入1mlcuso4飽和溶液、1ml濃度為2％硫氰酸銨溶液、0.5ml鹽酸-醋酸鈉緩沖液和0.5 ml飽和nacl溶液充分混和，稍后離心分離，棄去上層清液，小心地用少量水洗滌沉淀2～3次(注意每次用水不能超過(guò)1 ml)，加入0.5mlxiaosuan溶解后，轉(zhuǎn)移至lo0ml的容量瓶中加水定容至刻度線，搖勻。分別用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定其含銅量，由所得的維生素c含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以得到相應(yīng)樣品的試驗(yàn)結(jié)果。
該方法所得的試驗(yàn)結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差rsd在5％以內(nèi)加標(biāo)回收率在96.56％～100.67％，其精密度和準(zhǔn)確度均達(dá)到痕量分析要求。此方法的線性相關(guān)系數(shù)r=o 9989，表明相關(guān)性很好。
2紫外可見(jiàn)分光光度法
利用紫外分光光度法測(cè)定維生素c的含量是基于維生素c在紫外光區(qū)有特征吸收，但是因?yàn)榫S生素c結(jié)構(gòu)中具有不飽和鍵，具有還原性，不易穩(wěn)定存在，直接測(cè)定誤差較大。所以在利用紫外分光光度法測(cè)定時(shí)，維生素標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)樣的配制條件非常重要。曾國(guó)富，黃玉英研究發(fā)現(xiàn)，維生索c在ctab-c5h11oh-h2o微乳液體系中非常穩(wěn)定，它存在于微乳液滴膜的內(nèi)側(cè)，與滲透進(jìn)入液滴膜外側(cè)的溶液氧接觸的機(jī)會(huì)極少，該體系能極大地提高維生素c的穩(wěn)定性。
鄭京平等利用維生素c具有對(duì)紫外產(chǎn)生吸收和對(duì)堿穩(wěn)定的特性，建立了紫外分光光度快速測(cè)定水果、蔬菜維生素c的新方法。根據(jù)維生素c具有對(duì)紫外產(chǎn)生吸收和對(duì)堿不穩(wěn)定的特性，于波長(zhǎng)243nm處測(cè)定樣品溶液與堿處理樣品兩者吸光度之差，通過(guò)查校準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算樣品巾維生素c的含量。此法操作簡(jiǎn)單、快速準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，結(jié)果令人滿意。特別適合含深色樣品的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該方法簡(jiǎn)單易行，結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏度高，檢出限低，可快速測(cè)定水果、蔬菜中維生素c，值得推廣應(yīng)用。
張立科等介紹了在0～450µg／ml線性范圍內(nèi)，以cu2+作催化劑，以溶解氧將還原型維生素c氧化為在246.0 nm處無(wú)吸收的氧化型vc，實(shí)現(xiàn)了樣品各紫外干擾成分的本底校正，建立了種測(cè)定果蔬vc的新方法。該方法中維生素c破壞條件的選擇尤為重要，確定條件為：cu用量為30 g，反應(yīng)溫度為70℃，反應(yīng)時(shí)間為20min，加熱條件下，反應(yīng)速度快，無(wú)需加掩蔽劑。方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，測(cè)定了香蕉、西紅柿等果蔬中的vc含量，結(jié)果令人滿意。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)得出該方法rsd在0.32％～0.89％之間，實(shí)際測(cè)定了香蕉、西紅柿等樣品中的vc的含量，檢出限為0.2791g／ml，加標(biāo)回收率在97.16％～100.18%之間 。
3高效液相色譜法
前面介紹的方法由于在使用中有一定的限制，操作復(fù)雜、前處理較麻煩。因此在使用中有較大的局限性，目的已逐漸被高效液相色譜法所取代。hplc法具有檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)單、實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠等特點(diǎn)。
王艷穎，姜國(guó)斌等采用hypersil-c8fz譜柱、濃度0.1％的草酸作流動(dòng)相的高效液相色譜法，分析了草莓中的維生素c含量，取得了理想的效果。hplc檢測(cè)條件如下：
流動(dòng)相0.1％草酸溶液，流速1.0 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，進(jìn)樣量5µl，柱箱溫度3o℃。該方法分析中受樣品中其他雜質(zhì)的影響較小。測(cè)定草莓中維生素c的含量，回收率為97.4％～102.1％，說(shuō)明該方法具有所需試劑少、穩(wěn)定、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。精密度實(shí)驗(yàn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3％，說(shuō)明該方法重復(fù)性和再現(xiàn)性都是比較高的。
陳昌云等采用0.05 mol／l磷酸二氫鉀緩沖液：甲醇=80:20(v／v)作流動(dòng)相。流速為1.0 ml／min，二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm。測(cè)定蜜柚中維生素c含量在質(zhì)量濃度為20～100mg／l范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，方法回收率為92.4％～107.5％,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2％。
4 結(jié)語(yǔ)
測(cè)定維生素c含量方法很多，各種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，因?yàn)榫S生素c自身的不穩(wěn)定，導(dǎo)致了很多方法測(cè)定結(jié)果誤差較大，所以對(duì)維生素c穩(wěn)定存在條件的探索非常重要。高效液相色譜法因?yàn)闇y(cè)定較準(zhǔn)確、靈敏度高、選擇性好，有較好的發(fā)展前景，是目前發(fā)展較快的一種方法。
防爆電動(dòng)不銹鋼蝶閥的產(chǎn)品資料及適應(yīng)場(chǎng)地
怎樣提高電蒸汽發(fā)生器的蒸汽品質(zhì)呢
反應(yīng)釜冷卻系統(tǒng)常識(shí)說(shuō)明
燃?xì)鉅t防漏燃?xì)鈭?bào)警器
柴油車(chē)OBD遠(yuǎn)程在線監(jiān)控讓污染排放得到有效的改善
蔬果中維生素C含量的檢測(cè)方法
CP606型防火密封膠的特性介紹
豬肉灌腸加工技術(shù)
關(guān)于進(jìn)口在線水分測(cè)定儀你可能還不知道的事
DMH-2520型高壓絕緣電阻測(cè)試儀 絕緣電阻測(cè)量?jī)x價(jià)格
沖床周邊自動(dòng)化輔助設(shè)備 三合一開(kāi)平送料機(jī) 三合一伺服送料機(jī)
MY10-03 34420A兆歐表 美國(guó)安捷倫Agilent
介紹五種FEM1.02FT.18S型德國(guó)KNF計(jì)量泵的故障解決方法
通風(fēng)柜的布局與通風(fēng)系統(tǒng)清理的重要性
鹽霧腐蝕試驗(yàn)鹽水溶液的配制方法
DOA系列美國(guó)嘉仕達(dá)GAST壓縮機(jī)安裝和使用注意事項(xiàng)
意大利ATOS比例閥分類(lèi)及特點(diǎn)
高低溫試驗(yàn)箱安全隱患怎么排查
液相色譜儀供應(yīng)商談儀器的兩種泄漏問(wèn)題
關(guān)于種植屋面排水板有什么是我們不知道的
該論文將對(duì)蔬菜、水果常用的維生素c含量的檢測(cè)方法進(jìn)行綜述、比較。
1原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法問(wèn)接測(cè)定維生素c的含量，是利用維生素c可以與一些金屬離子發(fā)生氧化還原反應(yīng)，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)掉的金屬離子的量，進(jìn)而間接計(jì)算出維生素c的含量。
1.1以銀離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法
以銀離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法，是利用維生素c分子中的有二烯醇基具強(qiáng)還原性，可被xiaosuan銀氧化為去氫維生素c，同時(shí)產(chǎn)生黑色銀沉淀
沉淀經(jīng)離心分離后，將分離得到的沉淀用xiaosuan溶解后，再利用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定銀離子的含量，從而接測(cè)得維生素c含量，具體測(cè)定方法如下：
配制一系列濃度的維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液，依次吸取一定量的維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液置于10ml離心管中，分別加入2ml(1mg/ml) ag+標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后加水使總體積為4ml，搖勻，在室溫下避光放置35min離心分離棄去上清液，用2ml超純水洗滌沉淀3次，然后用l:1的濃xiaosuan3ml溶解沉淀，移入50ml的容量瓶中，加水稀釋至刻度。噴入空氣-乙炔火焰分別測(cè)定其吸光度，以維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以測(cè)得的吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。后將處理過(guò)的待測(cè)樣按上述方法測(cè)定其維生素c含量。
上述方法巾維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品的配制都是利用2％的檸檬酸作為溶劑，并在棕色瓶中保存，原因是維生素c在溶液中不穩(wěn)定，遇氧氣、光、熱、堿性物質(zhì)易受破壞，而在適當(dāng)?shù)乃嵝詶l件下比較穩(wěn)定，用2％的檸檬酸溶液來(lái)配制維生素c標(biāo)準(zhǔn)溶液，減緩了維生素c被氧化的速度，同時(shí)消除了一定外界因素的十?dāng)_，使得測(cè)定結(jié)果比較穩(wěn)定。
1.2 以銅離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法
文獻(xiàn)中報(bào)道了以銅離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法。該方法也是利用維生素c在酸性介質(zhì)中維生素c可將cu2+定量的還原為cu+，然后cu+與scn-反應(yīng)生成cuscn沉淀，在高速離心機(jī)下有效地分離出cuscn沉淀，洗滌后再經(jīng)濃xiaosuan溶解，用原子吸收法測(cè)定沉淀中的含銅量，即可推知樣品中維生素c的含量。具體測(cè)定方法如下：
分別吸取1ml配制的含一定量維生素c的標(biāo)準(zhǔn)溶液(隨配隨用)(分別含維生素c 50、100、200、300、400、500 µg)和樣品提取液，依次放置于已編號(hào)的15ml離心管中，各加入1mlcuso4飽和溶液、1ml濃度為2％硫氰酸銨溶液、0.5ml鹽酸-醋酸鈉緩沖液和0.5 ml飽和nacl溶液充分混和，稍后離心分離，棄去上層清液，小心地用少量水洗滌沉淀2～3次(注意每次用水不能超過(guò)1 ml)，加入0.5mlxiaosuan溶解后，轉(zhuǎn)移至lo0ml的容量瓶中加水定容至刻度線，搖勻。分別用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定其含銅量，由所得的維生素c含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以得到相應(yīng)樣品的試驗(yàn)結(jié)果。
該方法所得的試驗(yàn)結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差rsd在5％以內(nèi)加標(biāo)回收率在96.56％～100.67％，其精密度和準(zhǔn)確度均達(dá)到痕量分析要求。此方法的線性相關(guān)系數(shù)r=o 9989，表明相關(guān)性很好。
2紫外可見(jiàn)分光光度法
利用紫外分光光度法測(cè)定維生素c的含量是基于維生素c在紫外光區(qū)有特征吸收，但是因?yàn)榫S生素c結(jié)構(gòu)中具有不飽和鍵，具有還原性，不易穩(wěn)定存在，直接測(cè)定誤差較大。所以在利用紫外分光光度法測(cè)定時(shí)，維生素標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)樣的配制條件非常重要。曾國(guó)富，黃玉英研究發(fā)現(xiàn)，維生索c在ctab-c5h11oh-h2o微乳液體系中非常穩(wěn)定，它存在于微乳液滴膜的內(nèi)側(cè)，與滲透進(jìn)入液滴膜外側(cè)的溶液氧接觸的機(jī)會(huì)極少，該體系能極大地提高維生素c的穩(wěn)定性。
鄭京平等利用維生素c具有對(duì)紫外產(chǎn)生吸收和對(duì)堿穩(wěn)定的特性，建立了紫外分光光度快速測(cè)定水果、蔬菜維生素c的新方法。根據(jù)維生素c具有對(duì)紫外產(chǎn)生吸收和對(duì)堿不穩(wěn)定的特性，于波長(zhǎng)243nm處測(cè)定樣品溶液與堿處理樣品兩者吸光度之差，通過(guò)查校準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算樣品巾維生素c的含量。此法操作簡(jiǎn)單、快速準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，結(jié)果令人滿意。特別適合含深色樣品的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該方法簡(jiǎn)單易行，結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏度高，檢出限低，可快速測(cè)定水果、蔬菜中維生素c，值得推廣應(yīng)用。
張立科等介紹了在0～450µg／ml線性范圍內(nèi)，以cu2+作催化劑，以溶解氧將還原型維生素c氧化為在246.0 nm處無(wú)吸收的氧化型vc，實(shí)現(xiàn)了樣品各紫外干擾成分的本底校正，建立了種測(cè)定果蔬vc的新方法。該方法中維生素c破壞條件的選擇尤為重要，確定條件為：cu用量為30 g，反應(yīng)溫度為70℃，反應(yīng)時(shí)間為20min，加熱條件下，反應(yīng)速度快，無(wú)需加掩蔽劑。方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，測(cè)定了香蕉、西紅柿等果蔬中的vc含量，結(jié)果令人滿意。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)得出該方法rsd在0.32％～0.89％之間，實(shí)際測(cè)定了香蕉、西紅柿等樣品中的vc的含量，檢出限為0.2791g／ml，加標(biāo)回收率在97.16％～100.18%之間 。
3高效液相色譜法
前面介紹的方法由于在使用中有一定的限制，操作復(fù)雜、前處理較麻煩。因此在使用中有較大的局限性，目的已逐漸被高效液相色譜法所取代。hplc法具有檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)單、實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠等特點(diǎn)。
王艷穎，姜國(guó)斌等采用hypersil-c8fz譜柱、濃度0.1％的草酸作流動(dòng)相的高效液相色譜法，分析了草莓中的維生素c含量，取得了理想的效果。hplc檢測(cè)條件如下：
流動(dòng)相0.1％草酸溶液，流速1.0 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，進(jìn)樣量5µl，柱箱溫度3o℃。該方法分析中受樣品中其他雜質(zhì)的影響較小。測(cè)定草莓中維生素c的含量，回收率為97.4％～102.1％，說(shuō)明該方法具有所需試劑少、穩(wěn)定、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。精密度實(shí)驗(yàn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3％，說(shuō)明該方法重復(fù)性和再現(xiàn)性都是比較高的。
陳昌云等采用0.05 mol／l磷酸二氫鉀緩沖液：甲醇=80:20(v／v)作流動(dòng)相。流速為1.0 ml／min，二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm。測(cè)定蜜柚中維生素c含量在質(zhì)量濃度為20～100mg／l范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，方法回收率為92.4％～107.5％,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2％。
4 結(jié)語(yǔ)
測(cè)定維生素c含量方法很多，各種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，因?yàn)榫S生素c自身的不穩(wěn)定，導(dǎo)致了很多方法測(cè)定結(jié)果誤差較大，所以對(duì)維生素c穩(wěn)定存在條件的探索非常重要。高效液相色譜法因?yàn)闇y(cè)定較準(zhǔn)確、靈敏度高、選擇性好，有較好的發(fā)展前景，是目前發(fā)展較快的一種方法。
防爆電動(dòng)不銹鋼蝶閥的產(chǎn)品資料及適應(yīng)場(chǎng)地
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