人核仁形成區嗜銀蛋白(ag-nors)免疫組化試劑盒實驗步驟（建議方案）：
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度
.烤片： 將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次（即二甲苯ⅰ、ⅱ、ⅲ），每次
0 min；
3.水化： 切片經下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2 次（每次2min），85%
乙醇2 min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddh2o 洗2×2min；
4.抗原修復： 根據抗體說明書方法進行抗原修復，常采用高壓、微波（溫
度達到98~00℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddh2o 洗2×
2min，tbs 洗滌（2×2min）（具體修復方法見附）* 注：有些抗原勿需修復，
直接進入第5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑b，37℃濕盒孵育30 min；
6.加一抗：滴加用試劑c（即用型一抗），37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜；
7.洗滌： tbs-t 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑b，37℃濕盒孵育0 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的化二抗（試劑d），37℃濕盒中孵育
30 min；
0.洗滌： tbs-t 洗滌（3×5 min）；
.封閉： 滴加試劑tween 20，37℃濕盒孵育封閉20 min；
2.加hrp-sa： 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑e（：50~200，終濃度5~20 nm），
37℃濕盒中孵育30 min；
3.洗滌： tbs-t 洗滌（3×5 min），tbs 洗滌（2×5 min）；
4.顯色：應用dab 溶液（試劑f）顯色；
5.復染：自來水充分沖洗，復染，脫水，透明；
6.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
7.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。
關鍵詞：顯微鏡

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