丙酸蛛網(wǎng)菌PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)使用方法
丙酸蛛網(wǎng)菌pcr檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)使用方法:
一、樣品 dna 的制備
用自選方法提取 cps dna。注意：dna 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 dna，后面的 pcr 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)（以 10-10e6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 dn**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μl 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 te 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10e7 拷貝/μl（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10e7拷貝/μl，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10e7 拷貝/μl）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μl 10e7 拷貝/μl 的 cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10e6 拷貝/μl 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μl 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10e5拷貝/μl 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μl 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. nc 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μl 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 pcr（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。pcr 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 pcr ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
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煙塵凈化器分類(lèi)、功能介紹
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帶profinet通訊接口的電子秤性能
阻干態(tài)微生物穿透試驗(yàn)儀試驗(yàn)步驟
高低溫試驗(yàn)箱低溫降不到-40度，如何分析原因？
丙酸蛛網(wǎng)菌PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)使用方法
鋰電行業(yè)粉塵治理解決方案
如何對(duì)精密外圓磨床的工作臺(tái)換向進(jìn)行調(diào)整及修復(fù)？
選常州同捷西門(mén)子伺服電機(jī)維修服務(wù)中心，羊
工頻磁場(chǎng)輻射敏感度試驗(yàn)PMS（Power frequency magnetic susceptibility）
科技發(fā)展 智能窗簾電機(jī)的優(yōu)勢(shì)
二手雙機(jī)推料離心機(jī)價(jià)格
變壓器的運(yùn)行電壓規(guī)定
常用外墻保溫釘產(chǎn)品規(guī)格及參數(shù) 大全
數(shù)控外圓磨床的核心價(jià)值
全自動(dòng)次氯酸鈉發(fā)生器廠(chǎng)家推薦
瀝青保溫泵的實(shí)際應(yīng)用
電子壓縮試驗(yàn)機(jī)-數(shù)據(jù)可追溯
YD43H先導(dǎo)薄膜式高靈敏度減壓閥在化工蒸汽應(yīng)用
MTS傳感器RHM0235MP021S108100
一、樣品 dna 的制備
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2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μl 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
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4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μl 10e7 拷貝/μl 的 cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10e6 拷貝/μl 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μl 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10e5拷貝/μl 的陽(yáng)性對(duì)照。
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8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μl 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 pcr（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。pcr 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 pcr ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
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