植物蔗糖轉(zhuǎn)化酶(inv)elisa試劑盒
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。
以下文字為產(chǎn)品簡介,詳情以說明書為準(zhǔn),
適用于檢測(cè)人動(dòng)植物組織勻漿、細(xì)胞上清、血清、血漿、尿液或其他相關(guān)生物液體中濃度。
檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法,往預(yù)先包被抗體的微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、hrp標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物tmb顯色,tmb在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度(od 值),計(jì)算樣品濃度。
試劑盒規(guī)格及配置
名稱
96孔配置
48孔配置
微孔酶標(biāo)板
12孔×8條
12孔×4條
標(biāo)準(zhǔn)品
0.3ml*6管
0.3ml*6管
*
6ml
3ml
檢測(cè)抗體-hrp
10ml
5ml
20×洗滌緩沖液
25ml
15ml
底物a
6ml
3ml
底物b
6ml
3ml
終止液
6ml
3ml
封板膜
2張
2張
說明書
1份
1份
自封袋
1個(gè)
1個(gè)
自備物品
①.酶標(biāo)儀(450nm)
②.高精度加樣器及槍頭:0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
③.37℃恒溫箱
操作步驟
①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
②.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μl;
③.樣本孔先加待測(cè)樣本10μl,再加*40μl;空白孔不加。
④.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(hrp)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μl,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次 (也可用洗板機(jī)洗板)。
⑥.每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育15min。
⑦.每孔加入終止液50μl,15min內(nèi),在450nm波長處測(cè)定各孔的od值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)od值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
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