吸附劑選擇考慮的其它因素:
1、目標化合物在極性或非極性溶劑中的溶解度,這主要涉及淋洗液的選擇;
2、目標化合物有無可能離子化(可用調(diào)節(jié)ph 值實現(xiàn)離子化),從而決定是否采用離子交換固相萃取;
3、目標化合物有無可能與吸附劑形成共價鍵,如形成共價鍵,在洗脫時可能會遇到麻煩;
4、非目標化合物與目標化合物在吸附劑上吸附點上的競爭程度,這關系到目標化合物與干擾化合物是否能很好分離。
常見spe柱類型及應用:
極性柱:cn、nh2、psa、 20h、si-等;
非極性柱:c18、c8、c2、ch、cn、ph
陽離子交換柱:scx,prs,cba
陰離子交換柱:sax,psa, nh2,dea
共價型柱:pba
根據(jù)目標化合物性質和樣品種類,選用合適的spe柱和淋洗劑:
spe操作
活化吸附劑:
在萃取樣品之前要用適當?shù)娜軇┝芟垂滔噍腿≈2煌J焦滔噍腿≈罨萌軇┎煌?br>(1)反相固相萃取所用的弱極性或非極性吸附劑,通常用水溶性有機溶劑,如甲醇淋洗,然后用水或緩沖溶液淋洗。也可以在用甲醇淋洗之前先用強溶劑(如己烷)淋洗,以消除吸附劑上吸附的雜質及其對目標化合物的干擾。
(2)正相固相萃取所用的極性吸附劑,通常用目標化合物所在的有機溶劑(樣品基體)進行淋洗。
(3)離子交換固相萃取所用的吸附劑,在用于非極性有機溶劑中的樣品時,可用樣品溶劑來淋洗;在用于極性溶劑中的樣品時,可用水溶性有機溶劑淋洗后,再用適當ph 值的﹑并含有一定有機溶劑和鹽的水溶液進行淋洗。
spe操作
上樣:將液態(tài)或溶解后的固態(tài)樣品倒入活化后的固相萃取柱;
洗滌和洗脫:
在樣品進入吸附劑,目標化合物被吸附后,可先用較弱的溶劑將弱保留干擾化合物洗掉,然后再用較強的溶劑將目標化合物洗脫下來,加以收集。
spe應用:
復雜樣品中微量或痕量目標化合物的分離和富集;
例如,生物體液(如血液,尿等)中藥物及其代謝產(chǎn)物的分析、食品中有效成分或有害成分的分析、環(huán)保水樣中各種污染物(可揮發(fā)性有機物和半揮發(fā)性有機物)的分析都可使用固相萃取將目標化合物分離出來,水果/蔬菜中n-甲基氨基甲酸酯農(nóng)藥的分離21種n-甲基氨基甲酸酯農(nóng)藥及12種代謝物的分離純化樣品: 蘋果、橙、桃、草莓、大豆、胡蘿卜、花菜、萵筍、土豆、洋蔥、大米等固相萃取 (spe柱 bond elut amino-proply-bonded silica)。
1. 柱預處理 1ml 二氯甲烷
2. 樣品添加 1 ml 樣品
3. 樣品洗脫1 ml 二氯甲烷含%甲醇
4. 樣品揮干 n2、 40 ℃
5. 再溶解 加入100μl乙氰等待30秒加入900 μlh2o
6. 進樣100 μl樣品hplc分析
gc/ms及hplc柱后衍生檢測:
有機磷農(nóng)藥(c18bscs柱,含200mgc18和c8硅膠)
1. 柱預處理 甲醇
2. 樣品添加 70 ml 樣品
3. 樣品洗脫 1 ml 二氯甲烷含1%甲醇
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