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人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa試劑盒操作步驟

人胰高血糖素樣肽1(glp-1)elisa試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/l,120 ng/l ,60 ng/l,30 ng/,15 ng/l)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48t的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48t的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。 測定應在加終止液后15分鐘。
α2-纖溶酶抑制因子(α2pi)重組蛋白
α-胞襯蛋白(sptan1)重組蛋白
α-乳清蛋白(αla)重組蛋白
α-血紅蛋白穩定蛋白(αhsp)重組蛋白
β2-微球蛋白(β2m)重組蛋白
β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βace1)重組蛋白
β細胞素(βtc)重組蛋白
β-血小板球蛋白(βtg)重組蛋白
δ-促睡眠肽(δsip)重組蛋白
阿黑皮素原(pomc)重組蛋白
癌胚抗原(cea)重組蛋白
氨基己糖苷酶bβ(hexβ)重組蛋白
氨酰trna合成酶復合多功能相互作用蛋白1(aimp1)重組蛋白
八聚體結合轉錄因子4(oct4)重組蛋白
白介素10(il10)重組蛋白
白介素11(il11)重組蛋白
白介素12a(il12a)重組蛋白
白介素12b(il12b)重組蛋白
白介素12受體β2(il2rβ2)重組蛋白
白介素13(il13)重組蛋白
白介素15(il15)重組蛋白
白介素16(il16)重組蛋白
白介素17(il17)重組蛋白
白介素18(il18)重組蛋白

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