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是誰的PCR實驗又失敗了?

時間:周五下午坐標:實驗室認真點完96孔板的你,貼上封板膜,放入pcr儀,跑完4小時的程序后準備美美下班。看了一眼數據,再看一眼pcr板——你(瞳孔地震):“師兄!跑完pcr,邊緣孔的液體體積怎么看起來少了?”你師兄(仔細觀察):“把‘看起來’去掉。”
原來是因為
實驗室前輩們總結出了影響pcr的n大要素,反應步驟、引物設計……pcr板的選擇往往是最容易被忽視的,但同樣至關重要。
劃重點:pcr板的選擇,你避坑了嗎?
1. 污染源從核酸提取開始到后續目的片段定向擴增,都要在無dnase與rnase、無pcr抑制劑的環境中進行,否則這些污染物會大大降低擴增效率。這是pcr耗材的基本要求,質量的關鍵取決于生產環境的潔凈度和工藝質控。
2. 硬度硬質框架pcr板比普通pcr板有更高的硬度,不會出現“翹邊”的現象,在貼膜的時候方便對每個孔“雨露均沾”,達到良好的密封性。
3. 蒸發率pcr實驗在小體系(微升級別)中反應,且程序包含溫度的循環升降,這些都容易造成體系蒸發的邊緣效應,影響產物濃度。因此pcr板需搭配高質量的封板膜,降低體系蒸發率,確保最終數據的可靠性。
4小時pcr后的剩余體積(初始體積-20ul)
4.熒光轉化率pcr孔壁經特殊設計的二氧化鈦著色工藝,能優化熒光定量pcr (qrcr) 反應的熒光信號反射效率,減少孔間信號交叉污染。相較于透明的pcr耗材,白色pcr板和pcr管的孔壁能更靈敏地反射熒光信號,優化實驗結果。
特殊著色工藝的白色pcr耗材優化熒光信號結果
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不含dna、dnase、rnase、pcr抑制劑,在超過3000平方米的潔凈受控車間生產,環境滿足iso 14 644-1的5級、7級和8級標準。
機械強度好,不翹邊,易貼膜。
搭配封板膜使用,減少蒸發邊緣效應。
白色pcr產品優化熒光反射,減少孔間信號交叉污染。

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