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MCECs細胞傳代培養(小鼠心臟內皮細胞)

細胞:mcecs細胞
中文名稱:人小鼠心臟內皮細胞
生長特性:貼壁
培養基:dmem-h培養基 血清:10%fbs(gibco胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% fbs、10% dmso
細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,pbs緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25%yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基ph值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
(網絡信息主針對網絡推廣作用,僅供參考,細胞培養請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
目的應用雙哌達莫(dpm)、腺苷(ado)與ado拮抗劑(th)治療博萊霉(ble)肺纖維化小鼠,觀察肺、脾等病理變化,探討肺纖維化發病機理.
方法:
實驗第1天100只小鼠經氣管注入ble 8.5 mg*kg-1,隨機分ble、dpm、ado和th四組;
第2天起分別給予ns(100μl*d-1)、dpm、ado和th,劑量均為50mg*kg-1*d-1,共7天;
第4~30天內chu死動物,組織化學法觀察肺內纖維變化與脾、胸腺、骨髓病理學改變.
結果:
ble組和th組第4~6天脾、胸腺髓質與骨髓中許多基質細胞huai死導致組織嚴重疏松。
ble組第20天后脾與胸腺逐漸weisuo,肺與脾內網狀纖維大量增加。
dpm組與ado組第4~6天脾、骨髓壞死基質細胞較少,第30天肺未發生纖維化,淋巴器官未weisuo.
結論:
ble能致脾、骨髓等基質細胞大量huai死與嚴重組織疏松.內、外源性ado能輕度減少基質細胞huai死,促進淋巴組織與造血組織增生,抑制ble誘導的肺纖維化與淋巴器官weisuo.
關鍵詞:培養箱

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