hoechst 33258染色液(1mg/ml)使用說(shuō)明書
【產(chǎn)品組成】
component
sbj-1804s
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hoechst 33258染色液(1mg/ml)
1ml
-20℃，避光
【保存條件】
—20℃,避光,12個(gè)月
【產(chǎn)品概述】
hoechst 33258 也稱 bisbenzimide h 33258或hoe 33258 ，分子式為c25h24n6o · 3hcl。hoechst 33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低，常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。hoechst33258也用于普通的細(xì)胞核染色、dna 染色。hoechst 33258 染色液是濃縮的儲(chǔ)存液，稀釋后使用，一般推薦工作濃度為 1～5μg/ml，用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
【使用方法】
(一)固定的組織細(xì)胞染色
1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求，用無(wú)菌去離子水稀釋到自己所需濃度，即為hoechst33258染色工作液。細(xì)胞核染色時(shí)，一般推薦工作濃度為1～5μg/ml。
2、于細(xì)胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則*行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行hoechst33258染色，如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的hoechst33258染色。
2、室溫放置，輕輕吸除hoechst33258染色液。
4、用無(wú)菌的pbs或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。
5、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。
(二)活細(xì)胞染色
1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求，用無(wú)菌去離子水稀釋到自己所需濃度，即為hoechst33258染色工作液。細(xì)胞核染色時(shí)，一般推薦工作濃度為1～5μg/ml。
2、取96、24、6孔板培養(yǎng)細(xì)胞至合適狀態(tài)，按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、
6孔板加入1ml的比例，加入適當(dāng)?shù)膆oechst33258染色液，染液必須充分覆蓋細(xì)胞。
3、在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)。
4、輕輕吸除hoechst33258染色液。
5、用無(wú)菌的pbs或生理鹽水清洗2～3次。
6、進(jìn)行熒光檢測(cè)。
【注意事項(xiàng)】
1、hoechst 33258染色液(1mg/ml)應(yīng)稀釋至合適的濃度后使用。
2、熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，建議染色后盡快檢測(cè)。活細(xì)胞或組織染色后宜立即觀察。
3、為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4、避免反復(fù)凍融，否則容易失效。
5、hoechst 33258對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
6、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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