c-127細(xì)胞是源自rⅲ小鼠乳腺癌的未經(jīng)轉(zhuǎn)化的克隆株;c-127細(xì)胞培養(yǎng)上清液沒有逆轉(zhuǎn)錄酶活性。c-127細(xì)胞常用于肉瘤病毒誘導(dǎo)的聚集呈現(xiàn)及牛刺瘤病毒的體外定量測(cè)試。最近,c-127細(xì)胞常用作牛刺瘤病毒dna質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的受體。
種屬小鼠年齡(性別)
組織來源乳房
生長特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
生長培養(yǎng)基dmem高糖+10%fbs(+1%p/s
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;co2,5%溫度:37℃
c127小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞傳代操作步驟:
一、貼壁細(xì)胞傳代
1.提前將培養(yǎng)基、pbs放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)。
2.吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量pbs潤洗細(xì)胞。
3.加入適量胰mei,使胰mei的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰mei,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰mei作用。
4.c127小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡。
5.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
二、懸浮細(xì)胞傳代
1.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min。
2.棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液。
3.將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
c127小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,經(jīng)常見到黑色的顆?;蛐『邳c(diǎn),這種情況是怎么引起的呢?該怎么避免呢?原因:
黑點(diǎn),大概有細(xì)胞本身帶的,環(huán)境有的,還有人身上帶進(jìn)細(xì)胞間的,還有就是血清和培養(yǎng)基
1、如果小黑點(diǎn)有增殖趨勢(shì),那么就有可能是污染了,需要處理;
2、如果小黑點(diǎn)沒有增殖趨勢(shì),且不影響細(xì)胞生長,也不影響實(shí)驗(yàn)的話,則可能
a、是“黑膠蟲”,黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,本身就存在爭(zhēng)議。有人認(rèn)為是從血清中來的一種原蟲,也有人認(rèn)為是細(xì)菌,或是真菌,也有人認(rèn)為是血清中的蛋白的結(jié)晶。“黑膠蟲”可寄生于動(dòng)物細(xì)胞,也可以生存于培養(yǎng)基中,依靠c127小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生,并隨細(xì)胞傳代而傳代?!昂谀z蟲”與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)性生長,開始時(shí)對(duì)細(xì)胞并沒有什么影響,但當(dāng)黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時(shí)候,細(xì)胞生長就會(huì)受到影響直至死亡,嚴(yán)重影響了科研活動(dòng)的開展和進(jìn)行。以前(這個(gè)至少是10年以前),很多實(shí)驗(yàn)室在養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用國產(chǎn)血清,那時(shí)的血清可能質(zhì)量不過關(guān),有所謂的“黑膠蟲”,但是也沒有明確的鑒定。但是現(xiàn)在的血清,即使國產(chǎn)的,產(chǎn)品里這種現(xiàn)象就少見了。
b、是細(xì)胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗運(yùn)動(dòng)。
大鼠血管平滑肌細(xì)胞zl-056796 usmc 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人膀胱移行細(xì)胞癌zl-056795 um-uc-3 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
大鼠骨肉瘤細(xì)胞zl-056794 umr-106 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞zl-056793 uacc-812 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
gfp標(biāo)記的小鼠子宮頸癌細(xì)胞zl-056792 u14-gfp 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
小鼠子宮頸癌細(xì)胞zl-056791 u14 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤zl-056790 u-118 mg/u118mg 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞zl-056789 tt 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
正常小鼠睪丸sertoli細(xì)胞zl-056788 tm4 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
小鼠淋巴瘤細(xì)胞zl-056787 l5178y tk+/-clone(3.7.2c)1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人食管癌細(xì)胞zl-056786 te-11 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人食管癌細(xì)胞zl-056785 te-10 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
*人血管平滑肌細(xì)胞zl-056784 t/g ha-vsmc 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞(dmem)zl-056783 sw-13+dmem 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人滑膜肉瘤細(xì)胞zl-056782 sw 982 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人膀胱移行細(xì)胞癌zl-056781 sw 780 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人胰腺癌細(xì)胞zl-056780 sw1990/sw-1990 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人軟骨肉瘤細(xì)胞zl-056779 sw 1353 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
小鼠骨髓瘤細(xì)胞zl-056778 sp2/0-ag14 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人胃癌細(xì)胞zl-056777 snu-5 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞zl-056776 sk-n-mc 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞zl-056775 sk-nep-1 1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞zl-056774 sk-n-be(2)1×10?cells/t25培養(yǎng)瓶
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