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哮喘小鼠氣道反應性無創檢測方法的建立

采用雞卵清蛋白(ova)致敏和激發,建立balb/c 小鼠哮喘模型。具體分生理鹽水對照組和哮喘模型組,每組18 只,分成10 只及8 只兩部分,分別用無創和有創的方法測定氣道反應性(分別用penh-asthma組、penh-ns 組、ri-asthma 組、ri-ns 組表示)經相應致敏激發后,用小鼠*檢測其氣道反應性。霧化吸入0.2~50 mg/ml 倍增濃度的乙酰甲*激發,測定相應濃度下的增強的呼氣間歇(penh)值或氣道阻力(ri)值等指標。所有動物都行支氣管肺泡灌洗,收集灌洗液,涂片染色后分類計數。后測得 penh-asthma、ri-asthma 組的嗜酸粒細胞(%)為55.00±1.41,顯著高于對照組的0.44±0.62(p<0.01)。penh-asthma 組pc100 均 ≤6.25 mg/ml,對照組pc100 均≥12.5 mg/ml。同時,其log2(10pc100)值(5.36±0.84)顯著低于對照組(7.97±0.82),兩組比較差異有統計學意義(p<0.01)。penh-asthma組從mch 為3.12 mg/ml 開始,其penh 值明顯高于對照組。ri-asthma 組的ri 值從0.39 mg/ml 開始就明顯高于相應對照(p<0.05)。penh-asthma 組與 ri-asthma 組的氣道反應性相關(r=0.962,p<0.01)。
因此從氣道炎性指標上看,penh-asthma 組和ri-asthma 組的嗜酸粒細胞明顯高于各自的對照組(p<0.01)。而本實驗所制作的模型是參照我所于2006 年已成功制作的支氣管哮喘模型,說明該模型的氣道炎性有良好的重復性。而在氣道高反應性的檢測上,從pc100 的分布上看,penh-asthma 組出現penh倍增的mch 濃度級都集中在低水平(pc100 均≤3.12 mg/ml),而對照組的明顯集中在高濃度水平(pc100均≥25 mg/ml);penh-asthma 組log2(10pc100)值顯著低于對照組(p<0.01),強烈支持penh- asthma組存在氣道高反應性,也體現了penh 良好的檢測效能。而將反映penh-asthma 組和ri-asthma 組的氣道反應性的 penh 值和ri 行相關分析,結果非常接近1(p<0.01),這就證實了2 種方法密切相關。此外,在檢測小鼠氣道反應性過程中,行無創法的小鼠不必麻醉,而且每次可以同時檢測6 只小鼠,動態觀察也不受限;這些在有創法中都無法實現。綜上所述,以penh 為主要測定指標的無創肺功能檢測方法作為 balb/c 雌鼠氣道高反應性的檢測可行、高效。

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