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嬰幼兒食品和乳品中脂肪酸的測定

引言:脂肪作為人體的三大供能營養素之一,對人體有許多重 要的生理作用。油脂中90% 以上是脂肪酸,而脂肪酸又 分為飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸。 多不飽和脂肪酸中含有的n-6和n-3脂肪酸屬必需脂肪酸, 是人體無法合成而必須從食物中獲取的。 嬰兒體格、智力和行為的發育除了受先天因素和早期教 育的影響外,還與后天的營養狀況有很大關系。日本營 養學專家飯野節夫的研究結果表明,兒童的腦力發展 80% 以上取決于營養。而在眾多營養素中,脂肪酸與智力發 育有密切關系是受到學術界肯定的。中國農業大學食品 學院營養與食品安全系系主任何計國副教授說:“在注 意膳食脂肪合理攝入量的同時,必須考慮各種脂肪酸的 搭配。適宜比例的脂肪酸攝入,能降低患肥胖、心血管 疾病的危險性,并促進胎兒、嬰幼兒大腦和視覺的發育。” 因此,嬰幼兒食品中脂肪酸的組成引起人們的重視,衛 生部于 2010 年發布食品安全標準《gb 5413.27-2010 嬰 幼兒食品和乳品中脂肪酸的測定》[1],規定了脂肪酸的檢 測方法,本方法依據該標準方法中用氣相色譜法 對嬰幼兒食品和乳品中的脂肪酸進行了測定。
實驗部分:主要儀器設備與試劑儀器:氣相色譜儀,trace 1310,美國 thermofisher。試劑:碳酸鈉溶液,準確稱取 6 g *,加水溶解并定容至 100 ml;甲苯,色譜純;乙酰氯甲醇溶液:量取40 ml 甲醇于 100 ml 干燥的燒杯中,準確吸取 5.0 ml 乙酰氯逐滴緩慢加入,不斷攪拌,冷卻后轉移并定容至 50 ml干燥的容量瓶中;脂肪酸甲酯混合標準溶液,100 mg/l。
樣品前處理方法:稱取 0.5 g 待測樣品于 15 ml 干燥螺口玻璃管中,加入 5.0ml 甲苯,加入 10% 乙酰氯甲醇溶液 6.0 ml,旋緊螺旋蓋,振蕩混合后于 80℃ ±1℃水浴中放置 2 h,期間每隔 20min 取出振搖一次,水浴后取出冷卻至室溫。將反應后的樣液轉移至 50 ml 離心管中,分別用 3.0 ml 碳酸鈉溶液清洗玻璃管三次,合并碳酸鈉溶液于 50 ml 離心管中,混勻,5000 轉 / 分鐘離心約 5 min。取上清液作為試液,氣相色譜儀測定。
樣品的測定:上述衍生后的樣品中,分析物濃度范圍較寬,樣品直接進樣、稀釋 10 倍、100 倍后分別進樣,各組分分別以適合稀釋倍數的樣品進行定量。用 thermo scientific 全新一代的 trace1310 氣相色譜儀配 fid 檢測器進行檢測。樣品中衍生得到的脂肪酸甲酯可以用保留時間進行定性分析,峰面積進行外標法定量。 氣相色譜條件:色譜柱 tr-fame, 100 m, 0.25 mm, 0.20 μm(p/n: 260m238p, s/n: 0036515);柱溫采用程序升溫條件如下:60℃ ( 保持 1 min);20℃ /min 到 160℃,保持 2 min,4 ℃ /min 到 240 ℃ ( 保 持 15 min)。 載氣為高純氮氣 ( 純度 99.999%); 流 速 1.0 ml/min。 進樣口為 ssl 進樣口,溫度:260℃,進樣模式 split,分流比,10:1。檢測器溫度:280℃,氫氣 35ml/min,空氣 350ml/min,尾吹氣氮氣40ml/min。
結論:嬰幼兒食品中的脂肪酸采用乙酰氯甲醇甲酯化法生成脂肪酸甲酯,甲苯提取后進行氣相色譜儀測定。該方法操作簡單,重復性好,37 種脂肪酸甲酯采用 100m 的脂肪酸甲酯分析柱,得到了良好的分離。賽默飛世爾科技的 trace1300 系列氣相色譜儀用于嬰幼兒食品中脂肪酸甲酯的測定靈敏度高,結果準確。

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